[发明专利]药物组合物胰酶肠溶胶囊及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体而言，本发明涉及一种胰酶及其肠溶胶囊。另外，本发明还涉及上述产品的制备方法及应用等。

背景技术

胰酶，以胰蛋白酶原的形式在哺乳动物的胰腺细胞中合成，能够为肠激酶所活化，也能在弱碱性pH（如，生理pH）下自我活化。例如，中国专利02805619公开了生产重组胰蛋白酶的方法，通过在pH3.0-4.0的体系中表达来实现分泌表达，并且发现截短的胰酶（原）表达量更多，但是（自）激活后的活性只有180-200U/mg，而且没有提示其他位点的序列变化会造成的影响；中国专利200910055493通过在截短的胰酶（原）N端增加序列来增加胰酶的活性和稳定性，其试验数据值得考证，但是至少其生理温度（37℃）下无法被辅助激活（更无法自激活），这对于在人体中施用是极为不利的。

胰酶（原）适合在肠道环境中发挥作用，为了防止被胃酸等降解，通常配制成肠控释（如，肠溶）制剂，如参见中国专利99103124、200680029728、200710039100等。

本发明人经过长期研究，令人意外地发现了一种高活性的胰酶，其具有高自激活性，而且激活的最适温度接近于生理温度，并且在低温下几乎没有自激活性，因此特别适合实际的施用和储运、保存。另外，本发明人研究出了胰酶的肠溶性制剂的配方，其肠特异性释放性质已经达到国外著名药厂的水平，特别适合本发明的胰酶来配制。

发明内容

本发明的要解决的技术问题在于提供新的胰酶及其肠溶胶囊，其中无论胰酶本身，还是肠溶胶囊的原辅料配方和工艺，都有创新。另外，本发明还提供了一些中间产物和应用等。

具体而言，在提供了胰酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，或是在SEQ ID NO：2所示序列上添加、确实和/或取代一个或几个氨基酸残基而得的。在本发明的具体实施方式中，胰酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。该胰酶可以是化学合成的，但是优选是通过重组DNA技术表达获得的。

在第二方面，本发明提供了基因，其编码本发明第一方面的胰酶。基因的化学成分是核酸，通过经典的重组DNA技术，就能表达其编码的蛋白质/酶。在本发明的具体实施方式中，基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

在第三方面，本发明提供了载体，其包含本发明第二方面的基因。在第四方面，本发明提供了细胞，其包含本发明第二方面的基因。现在有诸多厂商提供了很成熟的载体和细胞以供克隆和表达。

在第五方面，本发明提供了用于治疗或预防肠道疾病的药物组合物，其包括本发明第一方面的胰酶和药学上可接受的载体。在本文中，如无相反指示，肠道疾病指的是胰酶能够治疗或预防的肠道疾病，优选是消化不良。所以，优选该药物组合物是用于治疗或预防消化不良。

在第六方面，本发明提供了胰酶肠溶胶囊，其由胶囊壳和装在胶囊壳中的颗粒组成，其中颗粒由丸芯和包裹在丸芯外的包衣组成，其中丸芯由胰酶、蔗糖、糊精和羟丙甲基纤维素组成，包衣由聚丙烯酸树脂、柠檬酸三乙酯和滑石粉组成。其中胰酶可以是本发明第一方面的胰酶，也可以是现有的胰蛋白酶、胰脂肪酶和/或胰淀粉酶。

优选在本发明第六方面的胰酶肠溶胶囊中，胰酶是本发明第一方面的胰酶。

目前药用辅料非常多，选取既要能够形成颗粒、又要在（肠道）碱性条件下快速释放、还要成本便宜并能使用当前设备的辅料，则非常困难。所以，优选在本发明第六方面的胰酶肠溶胶囊中，胰酶、蔗糖、糊精和羟丙甲基纤维素的重量比为23-35：3-12：2-7：0.3-1，优选为25-30：6-10：3-5：0.5-0.7，更优选为28：8：4：0.6。

另外优选在本发明第六方面的胰酶肠溶胶囊中，聚丙烯酸树脂、柠檬酸三乙酯和滑石粉的重量比为23-35：1-5：5-12，优选为27-31：2-4：6-9，更优选为29：3：7.5。

也优选在本发明第六方面的胰酶肠溶胶囊中，丸芯和包衣的重量比为优选为2-8：1-3，优选为4-6：1.5-2.5，更优选为5：2。

在第七方面，本发明提供了本发明第六方面的胰酶肠溶胶囊的制备方法，其包括

（1）将羟丙甲基纤维素溶于乙醇和水的混合溶液中，配制成羟丙甲基纤维素的乙醇水溶液，优选配制成1.5-3%（如2%）（W/W）羟丙甲基纤维素的乙醇水溶液；

（2）将胰酶、蔗糖和糊精混合后与步骤（1）获得的羟丙甲基纤维素的乙醇水溶液离心造粒成丸芯，优选造粒成粒径为0.85-0.95mm（优选0.9mm）的丸芯；