[发明专利]一种提高假单孢菌石油烃降解能力的方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物育种领域，具体为一种提高假单孢菌石油烃降解能力的方法。

背景技术

石油是一种成分十分复杂的天然有机化合物的混合物，主要成分为液态烃，石油烃类化合物是一种化学高分子有机物，很多烃都具有毒性，对环境污染严重，采取有效措施进行治理势在必行。采用假单孢菌降解石油烃是一种有效的方法，但目前主要问题是由于其降解效率低而导致降解成本高，变异频谱窄，变异率低，操作较复杂。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于提供一种利用离子辐射方法提高假单孢菌石油烃降解能力的方法，从而实现假单孢菌在石油烃降解方面的实际应用。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种提高假单孢菌石油烃降解能力的方法，其特别之处在于：采用离子辐射系统产生的离子束注入假单孢菌，使假单孢菌的石油烃降解特性得以提高，具体包括以下步骤：

步骤一：在无菌水中稀释假单孢菌，取出0.1-0.3ml均匀涂布于培养皿中；

步骤二：对离子辐射系统的辅真空室进行消毒，将准备好的样品放入离子辐射真空系统辅真空室中；

步骤三：打开辅真空室和主真空室之间的闸板阀，快速抽取真空到8*10^-4-2*10^-3Pa；

步骤四：开启氮离子辐射源，调整离子辐射工艺参数；

步骤五：进行氮离子辐射，完成后关闭氮离子辐射源，关闭闸板阀，给辅真空室充气，取出假单孢菌培养皿；

步骤六：采用常规微生物培养方法进行假单孢菌的培育，并进行石油烃降解能力的测试。

所述离子辐射源为气体离子源。

所述离子辐射工艺参数包括离子能量和注入剂量，其范围分别为10Kev-40Kev和1*10¹⁵ ions/mm² -4*10¹⁶ions/mm²。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

1. 本发明采用的离子辐射诱变育种，其离子能量和注入剂量方便调整和控制，适应性强；

2.本发明采用的离子辐射诱变育种，变异频率高，一般要比自然变异频率高1000倍以上；

3.本发明采用的离子辐射诱变育种，变异谱宽，即变异的类型多，能够产生自然界从未有过的新类型； 

4. 本发明采用的离子辐射诱变育种，变异稳定性好，可以大大缩短育种周期；

5. 本发明采用的离子辐射诱变育种方法简单，操作方便，普通技术人员均可胜任，而且稳定可靠。

具体实施方式

本发明所涉及的一种提高假单孢菌石油烃降解能力的方法，采用离子辐射系统产生的离子束注入假单孢菌，使假单孢菌的石油烃降解特性得以提高，具体包括以下步骤：

步骤一：在无菌水中稀释假单孢菌，取出0.1-0.3ml均匀涂布于培养皿中；

步骤二：对离子辐射系统的辅真空室进行消毒，将准备好的样品放入离子辐射真空系统辅真空室中；

步骤三：打开辅真空室和主真空室之间的闸板阀，快速抽取真空到8*10^-4-2*10^-3Pa；

步骤四：开启氮离子辐射源，调整离子辐射工艺参数；

步骤五：进行氮离子辐射，完成后关闭氮离子辐射源，关闭闸板阀，给辅真空室充气，取出假单孢菌培养皿；

步骤六：采用常规微生物培养方法进行假单孢菌的培育，并进行石油烃降解能力的测试。

所述离子辐射源为气体离子源。

所述离子辐射工艺参数包括离子能量和注入剂量，其范围分别为10Kev-40Kev和1*10¹⁵ ions/mm² -4*10¹⁶ions/mm²。

实施例一

1）在无菌水中稀释假单孢菌，取出0.1ml溶液均匀涂布于培养皿中；

2）将离子辐射系统的辅真空室用酒精进行消毒，将准备好的样品放入离子辐射真空系统的辅真空室中；

3）打开辅真空室和主真空室之间的闸板阀，快速抽取辅真空室至8*10^-4Pa；

4）开启氮离子辐射源，调整离子能量和辐射剂量分别为20Kev和0.75*1016 ions/mm²；

5）进行氮离子辐射，完成后关闭氮离子辐射源，关闭闸板阀，给辅真空室充气，取出假单孢菌培养皿；