[发明专利]工厂化生产丛枝菌根真菌菌剂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种丛枝菌根真菌菌剂的生产方法。

背景技术

菌根(mycorrhiza)是自然界中一种普遍的植物共生现象，其是土壤中的菌根真菌与高等植物根系形成的一种共生体。丛枝菌根(Arbuscular mycorrhiza，AM)是一种最常见的内生菌根，是土壤中的一种丛枝菌根真菌与植物根系形成的共生体。丛枝菌根真菌在自然界中分布广泛，已知世界上大约90%的有花植物以及蕨类植物和苔藓植物可与丛枝菌根真菌共生。

丛枝菌根真菌对植物养分循环的平衡和水分的有效利用起着重要的作用，可促进植物生长，提高植物移栽成活率，并能提高植物的抗逆性。而且，AM真菌对植物生长发育产生的诸多有益作用，特别是在AM真菌改善植物磷素、氮素和矿质营养方面。有研究表明，一定条件下接种AM真菌，能够促进植物对土壤中磷、锌、铜的吸收和利用，对氮、钾、镁、硫、锰等吸收也具有一定的作用。因此，丛枝菌根真菌在农林业生产及园林绿化领域具有广泛的应用前景。

我国氮肥平均使用量是美国的近3倍、澳大利亚的8倍多，这造成了大量不可再生能源的浪费，农田土质变坏，肥力下降，农作物品质降低，食品和地下水等环境污染状况也日趋严重。因此，在我国发展丛枝菌根真菌菌剂对农业、资源、环境的意义重大。

但是，丛枝菌根真菌是一类严格的共生真菌，它的生存严格依赖于活体高等植物，所以大规模的培养和生产丛枝菌根真菌菌剂难度较大。目前在实验室中获得丛枝菌根真菌的方法有很多，如：培养基培养法、静止营养液培养法、流动营养液培养法、喷雾液培法、AM真菌与植物离体根器官的无菌双重培养法和玻璃珠分室培养法等；但可用作丛枝菌根真菌菌剂生产的低廉、大规模的方法只有盆栽培养法和大田培养法。可是，盆栽培养法和大田培养法都有生产周期长（4～5个月）、受环境因素影响大、菌剂生产数量有限、孢子繁殖体数量少（80～100个/g菌剂）、质量不稳定和种植管理繁琐的问题。

发明内容

本发明要解决现有丛枝菌根真菌菌剂生产的低廉、大规模的方法存在生产周期长、受环境因素影响大、菌剂生产数量有限、孢子繁殖体数量少、质量不稳定和种植管理繁琐的问题，而提供的一种工厂化生产丛枝菌根真菌菌剂的方法。

本发明工厂化生产丛枝菌根真菌菌剂的方法按以下步骤进行：

一、将土壤、沙和蛭石按5:2:3的体积比混合成基质，再将含40%甲醛的福尔马林用水稀释50倍后均匀喷洒到基质上，然后用塑料布密封1昼夜，之后铺开，在阳光下爆晒4～6天，即得到丛枝菌根真菌菌剂培养基质；

二、高粱、苜蓿或三叶草的种子用20～30℃温水搓洗2～3次，再用浓度为0.3%的高锰酸钾溶液浸泡3～4小时，然后用清水淘洗干净，之后再用20～30℃的清水浸种24小时、并淘洗2～3次，催芽，完成宿主种子处理；

三、将丛枝菌根真菌菌剂培养基质放入四周为水泥混凝土、底部为红砖的培养池内，然后将经过处理的宿主种子和丛枝菌根真菌共同施于丛枝菌根真菌菌剂培养基质表面，再喷洒浓度为150nmol/L的5,7,4'-三羟基黄酮溶液，之后再覆盖厚度为0.4～0.7cm的丛枝菌根真菌菌剂培养基质；其中，5,7,4'-三羟基黄酮溶液的用量为250mL/平方米；培养池深度为0.25～0.35米；

四、常规田间管理，培养至第7周去除宿主植物的茎叶部分，继续培养到第8周再去除丛枝菌根真菌菌剂培养基质中宿主植物的主根，把不定根与丛枝菌根真菌菌剂培养基质混匀、造粒，即得到丛枝菌根真菌菌剂。

本发明方法具有生产只需8周，而且得到的每克丛枝菌根真菌菌剂中丛枝菌根真菌的有效孢子数量为120～150个，具有生产周期短、产量高的优点。

本发明方法所有培养基质价格低廉，而且操作简单，适合大规模丛枝菌根真菌菌剂的生产。由于本发明方法通过对丛枝菌根真菌菌剂培养基质和宿主种子的处理，以及培养池的设计排除了其他因素对丛枝菌根真菌繁殖的干扰，促进了丛枝菌根真菌的产量，并大幅提高了产品的稳定性。而且，本发明田间管理采用常规方法，具有省时省力的优点。

附图说明

图1是实施例1中高粱根受摩西球囊霉侵染显微镜观察图。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式工厂化生产丛枝菌根真菌菌剂的方法按以下步骤进行：