[发明专利]一种高色价朱红菌素的获取方法有效
申请号: | 201310289889.5 | 申请日: | 2013-07-11 |
公开(公告)号: | CN103333922A | 公开(公告)日: | 2013-10-02 |
发明(设计)人: | 宋福强;常伟;郭夏立 | 申请(专利权)人: | 黑龙江大学 |
主分类号: | C12P1/02 | 分类号: | C12P1/02;C12R1/645 |
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地址: | 150080 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高色价 朱红 菌素 获取 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种天然色素的获取方法。
背景技术
色素被广泛的应用于食品工业、仿真食品、医药学、化妆品、高级饲料等领域,而色素又分为人工合成色素和天然色素。
人工合成色素是指以煤焦油为原料制成的色素,其种类繁多,如呫啶系染料、蒽醌系染料、偶氮系染料、氮萘系染料等等。人工合成色素的性质通常比较稳定,有着较好的色调、色价、溶解性和着色能力,同时生产成本低、产品品质稳定,因而使用较为广泛。然而近年来大量研究发现,人工合成色素不仅不能为人体提供营养物质,还会对人体健康造成危害。
天然色素是指来源于动植物、微生物等天然资源的色素。根据其化学结构的不同可分为:①吡咯衍生物,如叶绿素、血红素和胆素等;②异戊二烯衍生物,如类胡萝卜素类等;③多酚类衍生物,如花青素、话黄素、儿茶素、单宁等;④酮类衍生物,如红曲色素、姜黄素等;⑤醌类衍生物,如虫胶色素、胭脂虫红等;按照其溶解性质的不同,天然色素还可以分为水溶性色素和脂溶性色素。
与人工合成色素相比天然色素安全性好,还兼具有营养和药理作用,是理想的色素选择。真菌色素是天然色素的一种,目前发现的真菌色素化合物包括醌类、酸类、杂环以及含氮化合物,其中以醌类化合物为主,这类化合物具有重要的药理活性,例如青紫色素杆菌素被众多学者报道具有止痛、去热、抗癌的作用。而且相对动物和植物原料而言用真菌生产色素具有无可比拟的优势,它生产周期短、产量高、不受时间空间的限制,便于工业化生产,同时不受气候和环境的影响。因此,真菌作为色素的产生资源具有巨大的开发潜力。
血红栓菌(Trametes cinnabarina(Jaxq.)Fr.var.sanguine)是红栓菌(Trametes cinnabarina(Jacq.:Fr.)Fr.)的小孔变种,隶属于担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、多孔菌科、栓菌属。血红栓菌生于针、阔叶树枯枝上,往往成群成片生长。在我国主要分布于黑龙江、云南、贵州、广东和重庆等省市。血红栓菌具有消炎、止痒、解毒、生肌、顺气、清热除湿、止血等功效;对艾氏癌和小白鼠肉瘤180的抑制率均为90%,同时对癌细胞也有抑制作用。此外,血红栓菌还含有多孔蕈素,因而对革兰氏阴性和阳性菌均有抑制作用。血红栓菌内含有红色天然色素——朱红菌素(cinnabarine),朱红菌素还具有药理作用,能够抗狂犬病毒(A Jr,Marques CJ,EF,Zanetti CR,Carobrez SG,Tramonte R,Loguercio-Leite C.Toxicity and Antiviral Activity of Cinnabarin Obtained from Pycnoporus sanguineus(Fr.)Murr Phytother Res.2003Nov;17(9):1069-1072.)。
由于真菌色素稳定性较差,加之传统提取技术,如压榨法、粉碎法、回流法、有机溶剂提取法,存在操作复杂、生产成本高、产品纯度低、有溶剂残留、热敏性组分被破坏等,导致朱红菌素色价低,阻碍了朱红菌素的推广应用。
发明内容
本发明为了解决现有朱红菌素色价低的问题,而提供的一种高色价朱红菌素的获取方法。
高色价朱红菌素按以下步骤进行获取:
一、将复壮后的血红栓菌菌丝转接入PDA液体培养基中,在28±1℃、转速为140r/min的条件下发酵培养10~15天,然后过滤除去菌丝体;
二、树脂预处理:用浓度为95%的乙醇浸泡树脂24h,然后用湿法装柱将树脂装填入层析柱,逆流洗柱,再用浓度为95%的乙醇洗涤树脂,流速为每小时2倍柱体积,直至洗出液与蒸馏水1:5混合不浑浊为止,再用蒸馏水洗涤树脂,流速为每小时2倍柱体积,直至洗出液没有乙醇味为止;
三、将经过预处理的树脂加入步骤一滤液中进行吸附,搅拌混合12~14h后将树脂装入层析柱中,以15mL/min速率水洗2个柱体积,收集洗脱液,然后再以15mL/min的速率用浓度为70%的乙醇洗脱,至乙醇洗脱液的A416值小于0.5停止收集洗脱液;
四、调解收集到的洗脱液pH值为11~12,或者向洗脱液中按0.25mol/L的比例投加K+、Na+、Gu2+、Zn2+或Al3+离子,即得到高色价朱红菌素。
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