[发明专利]一种用于肺癌诊断的液相芯片试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及医药生物领域，尤其涉及一种用于肺癌诊断的液相芯片试剂盒。

背景技术

目前肺癌是全球范围内发病率及死亡率最高的恶性肿瘤。近20年来，由于大力推行戒烟，欧洲和美国等西方国家男性肺癌的发病率已开始下降。但女性肺癌的发病率却持续上升。我国是香烟生产和销售大国，不论男性还是女性。肺癌的发病率均呈持续上升趋势，尤以女性发病率上升更快。临床研究表明，原位癌治愈率接近100%。Ⅰ期肺癌患者的5年生存率达60%～90%，而IIIb和Ⅳ患者的5年生存率仅5%～20%。提示早期诊断是改善肺癌预后的关键。据美国国立癌症研究所的统计资料显示，如果能在肺癌Ⅰ期作出诊断，其五年生存率可达90%以上；而在Ⅱ期以后，则五年生存率急剧降至20%以下；发展第Ⅲ、Ⅳ期，手术不但无益，而且还有可能促使肿瘤加快扩散，加速死亡。因此，如何提高肺癌早期诊断水平已成为肺癌防治工作者面临的严肃而紧迫的任务。

现今为止对肺癌的检测手段依赖于CT、MR、PET等影像检测仪器，但这些影像手段一般只能发现1-2cm以上的肿瘤，而肿瘤从病变到生长到1-2cm，一般要经过2-5年甚至更长的时间，因此癌症早期漏诊率高达80-90%。

目前，早期诊断癌症通常是通过验血寻找肿瘤标志物，特别是其中的蛋白标志。血清肿瘤标志物的测定方法主要有放射免疫分析、酶免疫分析、化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析等。然而，这些方法都是单指标的检测方法：而对肿瘤进行单一标志物的检测始终存在着特异性不强、灵敏度低等不足，特别是对早期肿瘤的检出率不高，因此可能会造成部分患者漏诊。

血清中的肿瘤抗原等标志物能诱导机体产生自身抗体，在肿瘤发生还未能被临床检查手段检测到的早期，机体免疫系统就可监测到低水平表达的肿瘤抗原的存在，并引发免疫反应，产生大量的抗体，起到有效的生物信号放大作用。

对比临床常用的肿瘤标记物蛋白，自身抗体的检测在肿瘤诊断中占极大的优势。如，可以对肿瘤进行早期诊断，便于早期治疗，提高治愈率。多项研究表明在影像学检查确诊实体癌数月至数年前即可检测到自身抗体的存在，甚至在肿瘤确诊前2-10年就可检测到血清中有针对肿瘤抗原的抗体，同时自身抗体比相应肿瘤抗原的滴度高。

尽管如此，自身抗体的检测也有其局限性，比如在一般情况下，同种肿瘤可异常地产生一种或多种肿瘤自身抗体，而不同肿瘤或同种肿瘤的不同组织类型既可检出共同的肿瘤抗体，也可检出不同的肿瘤抗体。

因此，如何将自身抗体和肿瘤抗原的检测联合起来，筛选出适合的肿瘤标记物组合，对提高肿瘤诊断的敏感性和准确性具有重要的意义。

发明内容

本发明提供了一种用于肺癌诊断的液相芯片试剂盒，对血清中的抗原和抗体并行检测，不存在交叉反应，准确率高，可高通量、快速的实现早期肺癌的诊断。

一种用于肺癌诊断的液相芯片试剂盒，包括：包被捕获抗体的微球、生物素标记的检测抗体、耦连Halotag Amine(O₂)ligand的微球、抗原蛋白、链霉亲和素-藻红蛋白和生物素标记的抗人免疫球蛋白G；其中，

捕获抗体为CRP捕获抗体、Prolactin捕获抗体、CEA捕获抗体、NSE捕获抗体、CK19捕获抗体、Axl捕获抗体和ADAM8捕获抗体中的至少一种；

检测抗体为CRP检测抗体、Prolactin检测抗体、CEA检测抗体、NSE检测抗体、CK19检测抗体、Axl检测抗体和ADAM8检测抗体中的至少一种，且与捕获抗体相对应；

抗原蛋白为p62、CTAG、p53和CAGE中的至少一种；

带有不同捕获抗体或抗原蛋白的微球具有不同的颜色编码。

NSE：神经特异性烯醇化酶，烯醇化酶是一种糖酵解酶，普遍存在于哺乳动物的组织中，以系列同工酶二聚体的形式存在(αα、αβ、ββ、和γγ)。

CK19：Cyfra21-1，细胞角蛋白19片段，是分子量约30kDa的上皮细胞角蛋白的可溶性成分之一，是一种非常好的鉴别肺良恶性疾病的标志物，尤其对肺鳞癌的检测效果更好。

CEA：癌胚抗原，是一种存在于多种肿瘤细胞中的肿瘤抗原，肺癌细胞能直接产生CEA。

CRP：C反应蛋白，作为一种急性时相蛋白，受年龄、免疫状况、药物等因素影响较小，其对临床各种急、慢性感染，组织损伤等疾病的诊断、疗效观察及预后判断的意义已被人们所认识。