[发明专利]猪链球菌多肽和编码其的多核苷酸以及它们在疫苗和诊断中的应用

说明书

本申请是申请日为2006年9月1日的发明名称为“猪链球菌多肽和编码其的多核苷酸以及它们在疫苗和诊断中的应用”的中国专利申请No.200680038555.9的分案申请。

发明领域

本发明涉及链球菌(Streptococcus)领域。更具体地，本发明涉及鉴定多肽和编码其的多核苷酸序列，其涉及猪链球菌(Streptococcus suis)的发病机制。本发明还涉及将所述多肽用于预防、治疗和诊断与猪链球菌相关的疾病和由猪链球菌导致的感染的组合物和方法中的应用。

发明背景

猪链球菌是一种重要的猪病原体，其导致许多病理疾病诸如关节炎，心内膜炎，脑膜炎，肺炎和败血病(13,14)。其还是对于接触污染的猪或它们的副产物的人的重要的动物传染病病原体，导致脑膜炎和心内膜炎(1,36)。目前已知基于荚膜抗原的三十三种血清型(1-31型，33和1/2型)(9-11,15,17,31)。2型被认为是在染病的猪中最致命和最流行的类型。目前还不完全了解涉及猪链球菌的发病机理和致病力的机制（13）并且尝试控制感染的努力被缺乏有效疫苗所阻碍。

已经开展了一些方法来开发猪链球菌的疫苗。然而，取得的成功十分有限，因为保护是血清型或菌株依赖型的并且结果在大多数情形中是不可靠的(16,30)。例如，报道了一些用杀死的全细胞和活的无毒疫苗获得的保护，但是这需要重复的免疫并且针对异种攻击的保护是不确定的(18,38)。将幼猪暴露于活的致病力强的菌株显示在减少猪链球菌感染的临床体征特征上具有积极的效果，但是在减少中枢神经体征和死亡率上则差强人意(35)。由于猪链球菌荚膜在致病力中具有重要作用，因此进行了基于荚膜物质开发疫苗的尝试。然而，这种疫苗是不令人满意的，因为荚膜多糖的免疫原性较差(7)。最近，已经将兴趣转移到将猪链球菌的蛋白质抗原作为疫苗候选物上。已经显示，使用suilysin(20)，或MRP(溶菌酶-释放蛋白质)和EF(细胞外蛋白质因子)(39)的亚单位疫苗保护猪免于同型和异型2型血清型菌株，但是它们的应用被这样的事实所妨碍，即在一些地理区域中的显著数量的致病力强的菌株并不表达这些蛋白质(8,12,29)。因此，鉴定其它的抗原因子，尤其是表面蛋白质可以有助于开发亚单位疫苗。

因此，有开发和应用用于预防、治疗和诊断猪链球菌相关疾病和猪链球引起的疾病的新靶标的需要。

发明概述

本发明的目标满足上述需要。更具体地，通过提供在SEQ ID NO:1提出的氨基酸序列的N端区域包含至少15个连续氨基酸的分离的多肽来实现该目标。

本发明的另一个目标还涉及编码如上定义的多肽的多核苷酸。

本发明还涉及特异性结合于本发明的多肽的抗体。

本发明的另一个目的是提供包含如上定义的多核苷酸的载体。

本发明的另一个目的是提供用于预防或治疗猪链球菌相关疾病或由猪链球菌导致的感染的组合物，其包含可接受的载体和下列成分的至少一种：

-如上定义的多肽；

-如上定义的多肽；

-如上定义的抗体；

-如上定义的载体。

本发明的另一个目标涉及治疗和/或预防动物中猪链球菌相关疾病或感染的方法，所述方法包括向动物施用如上定义的组合物的步骤。

另一个目标涉及检测样品中猪链球菌菌株的存在或不存在的方法，所述方法包括下列步骤：

a)在足以形成免疫复合物的条件下，将所述样品与本发明的抗体接触一段时间；和

b)检测在a)中形成的免疫复合物的存在或不存在。

本发明的另一个目标涉及检测样品中针对猪链球菌菌株产生的抗体的存在或不存在的方法，所述方法包括下列步骤：

a)在足以形成免疫复合物的条件下，将所述样品与本发明的多肽接触一段时间；和

b)检测在a)中形成的免疫复合物的存在或不存在。

本发明还在另一个目的中提供用于检测指示猪链球菌菌株的抗体的存在或不存在的诊断试剂盒，所述试剂盒包括：

-根据本发明的多肽；

-检测多肽-抗体免疫复合物的试剂；

-缺乏与所述肽免疫性结合的抗体的生物参比样品；和

-包含可以特异性结合于所述肽的抗体的比较样品；

其中所述多肽，试剂，生物参比样品，和比较样品以足以进行所述检测的量存在。

另一个目的是提供用于检测指示猪链球菌菌株的抗体的存在或不存在的诊断试剂盒，其包括：