[发明专利]甜叶菊粗品中甜菊糖苷的分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及高甜度、低热值天然甜味剂的分离纯化方法，具体涉及吸附分离纯化甜菊苷的方法。

背景技术

甜叶菊(stevia rebaudiana)别名甜菊﹑糖草，属菊科(Compositae), 斯台维亚属，原产地在南美亚热带地区。我国自1976年开始由南京中山植物园、中国农业科学院等科研单位先后从日本引进甜叶菊试种成功。甜叶菊含有14种微量元素﹑32 种营养成分，在体内不代谢、不蓄积、不致癌、无毒性，其安全性已得到国际FAO和WHO以及美国FAD等组织的认可，因此它既是极好的糖源，又是良好的营养来源。 

甜叶菊糖苷，简称甜菊苷，是从干燥后的甜叶菊叶片中提取出来的一类具甜味的萜烯类配糖体，主要包含8种具有不同甜度的糖苷。甜菊苷具有高甜度(为蔗糖的 200-300倍)﹑低热量(仅为蔗糖的1/300)的特性，长期食用不会使人发胖，特别适宜肥胖病、糖尿病、高血压、动脉硬化、龋齿病患者使用，而且物理、化学性能稳定、无发酵性，可延长甜叶菊糖苷制品的保质期。因而日益引起人们的关注和重视，被广泛应用在食品和药物行业中，被誉为继蔗糖、甜菜糖之后的第三种天然糖源，是最有发展前途的新糖源。

天然产物研究的成果己广泛应用于医药和保健业，为保障人类健康提供了许多有价值的药物。从植物中提取的一些产物，大多数具有针对性强、毒副作用小等特点，是医药工业中新药研究的主要源泉之一。MAR在天然产物有效成分分离纯化中的优势主要表现在以下两个方面：其一，已有许多天然产物的有效成分成功通过MAR技术提取，这为其它天然产物有效成分的提取研究打下了基础；其二，不断有新的MAR问世，这为天然产物有效成分的分离提供了可供选择的高效树脂。

大孔吸附树脂（MAR）是由可聚合单体、交联剂等可聚合成分与致孔剂、分散剂等添加剂经悬浮（或反相悬浮）聚合反应制备而成的一种球状、具有多孔结构的高分子吸附分离材料，具有吸附容量大、一定的选择性、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、使用周期长、宜于构成闭路循环、节省费用等诸多优点，已被广泛应用于废水处理、医药工业、化学工业、分析化学、临床鉴定等领域。MAR的品种很多，不同MAR对不同物质的吸附选择性也有差异。MAR的选择性不仅表现在对某些物质吸附程度的差别，有时还直接表现为对目标物质的吸附与分离，这样，MAR可用于从混合物中对有效成分的分离、纯化。

虽然目前对MAR应用的研究已经相当广泛，但主要集中在利用合成或市售的某一种MAR对底物进行简单的吸附分离实验。由于不同的MAR在极性、功能基、孔径、孔容及比表面积等结构参数方面都有所不同，而某一种MAR对多种成分也有不同程度的吸附，因此，对于一些物质结构较为相似成分的分离，采用单一类型的MAR往往很难达到对其较好的分离效果，通常分离后纯度高的回收率低，回收率高的产品纯度低，这在一定程度上限制了MAR应用研究更好地发展。

利用静态吸附，虽可在相同条件下平行地进行多个实验，同时可在等温条件下进行吸附，研究吸附量与时间或平衡浓度的关系，可以得到吸附动力学曲线或吸附等温线，进行相关的理论研究，但其并不适合于大规模的工业生产，这限制了MAR在工业生产中的应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种甜叶菊粗品中甜菊糖苷的分离纯化方法。

本发明是甜叶菊粗品中甜菊糖苷的分离纯化方法，其步骤为：

（1）将活化好的大孔吸附树脂采用湿法装柱装入交换柱中；

（2）将甜叶菊粗品配成0.05～0.6 g/L做为吸附液，使其流经大孔树脂树脂混合床，进行动态吸附；

（3）将步骤(2)得到的吸附后的大孔吸附树脂混合床用蒸馏水洗涤，然后加入洗脱剂 5%，60%乙醇以及乙醇和乙酸乙酯混合液，使其依次以相同流速流经树脂混合床，进行梯度洗脱;

（4）将解吸液蒸发浓缩，烘干，即得甜菊苷。

本发明的有益之处是：(1)在最佳工艺条件下，采用MAR混合床法实现了对甜菊苷的更高效分离，为甜菊苷的工业化生产打下了基础；(2) 本发明所设计到的工艺路线、所用试剂等均为国际上所公认的绿色环保技术。

附图说明

 图1为本发明的工艺流程图。

具体实施方式

本发明是甜叶菊粗品中甜菊糖苷的分离纯化方法，其步骤为：

（1）将活化好的大孔吸附树脂采用湿法装柱装入交换柱中；

（2）将甜叶菊粗品配成0.05～0.6 g/L做为吸附液，使其流经大孔树脂树脂混合床，进行动态吸附；