[发明专利]防治香料烟黑胫病的生防菌株YKY01及其生防菌剂

权利要求书

1.一种防治香料烟黑胫病的生防菌株YKY01，为解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus amyloliquefaciens)，2013年6月15日保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏号：CGMCC NO.7723。

2.用权利要求1所述的生防菌株YKY01制备的防治香料烟黑胫病的生防菌剂，其特征在于该生防菌剂经如下步骤得到：

a. 将菌株YKY01移植到培养皿中进行一环活化，33℃ 培养72小时；培养皿中的NA固体培养基配方为：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，琼脂15.0g，蒸馏水1L，PH值7.3；

b. 取一环活化后的菌苔移入用500ml三角瓶装的300ml配方为：蛋白胨10.0g,牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，蒸馏水1L，PH值7.3的NA培养液中，在175转/min、33 ℃下培养72小时，获得一级发酵菌液；

c. 将一级发酵菌液按接种量1：150培的比例接种于种子罐中与b步骤相同的NA培养液中发酵培养，种子罐的温度32～35℃，发酵48小时后，获得二级发酵用菌种液；

d. 将二级发酵用菌种液按接种量1：15倍的比例接种于发酵罐中与b步骤相同的NA培养液中发酵培养，发酵罐的温度为32～35℃，发酵120小时，当发酵罐中的发酵液中芽孢含量大于或等于88%，酸碱度为6.8～7.4时，储存作为生防菌液；

 e. 将生防菌液1500rpm离心3 min，取离心后的菌体与专用保藏液配成活性菌剂，使成品中活菌总浓度为1×10¹¹ CFU/ml以上；菌体专用保藏液重量百分比配方为：硅酸镁铝 0.5%，黄原胶 0.12%，尿素 3%， SP-2728梳型高分子分散剂 2.3%，蒸馏水94.08%。