[发明专利]一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法

权利要求书

1.一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，称取黔曲粉末0.5-1.5g，置平底烧瓶中，加入甲醇约30-80ml，回流提取1-4小时，滤过，临用前用微孔滤膜滤过；照高效液相色谱法建立指纹图谱；

所述高效液相色谱法的色谱条件为：ODS C₁₈（4.6mm×250mm，5μm）；流动相A为乙腈；流动相B为0.05%-0.2%的磷酸水溶液；检测波长240-280nm；柱温：20-30℃；流速：0.7-0.9ml/min；洗脱程序为梯度洗脱程序。

2.根据权利要求1所述的一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：

(a)供试品溶液制备：称取黔曲粉末1g，置平底烧瓶中，加入50ml甲醇回流提取2小时，滤过，临用前用微孔滤膜滤过，即得供试品溶液；

(b)色谱条件：依利特ODS C₁₈（4.6mm×250mm，5μm）；流动相A为乙腈；流动相B为0.1%的磷酸水溶液；检测波长272nm；柱温：25℃；流速：0.8ml/min；洗脱程序为梯度洗脱程序；

(c)测定：吸取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到黔曲的指纹图谱。

3.根据权利要求1或2所述的一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：所述微孔滤膜是用0.45μm的微孔滤膜。

4.根据权利要求1或2所述的一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：所述梯度洗脱程序中流动相A与流动相B的体积比浓度为：0min：5%，95%；5min：5%，95%；12min：12%，88%；52min：50%，50%；60min：70%，30%；70min：100%，0%；75min：100%，0%。

5.根据权利要求1或2所述的一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：所述黔曲指纹图谱中有10个特征共有峰，图谱总长度为75min。

6.根据权利要求1或2所述的一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”2004版对所述指纹图谱进行相似度评价，其相似度应大于0.950；指纹图谱相似度计算参数设置为：时间宽度为0.5秒；校正方式采用多点校正，校正色谱峰的匹配点为共有峰。