[发明专利]一种用于检测P24抗原的碳量子点试纸条的制备方法

权利要求书

1.一种用于检测P24抗原的碳量子点试纸条的制备方法，包括在底板两端分别粘结样品垫和吸水垫的步骤，其特征在于：还包括以下步骤：

（1）P24碳量子点垫的制取和P24硝酸纤维素膜的制备；

（2）在所述底板上依次相互搭接地粘结所述样品垫、P24碳量子点垫、P24硝酸纤维素膜和吸水垫，得到试纸板；

（3）将试纸板切割成若干条符合规定宽度的试纸条，并将试纸条密封保存。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：上述（1）中的P24碳量子点垫的制取按以下步骤进行：

1）制备、纯化碳量子点溶液，其步骤如下：

a、用三口摇瓶收集碳灰与硝酸溶液，并混匀；

b、将上述混匀的溶液在100℃磁力搅拌下回流12h，再以3000rpm 、4℃离心10 min，分离未反应的碳灰；

c、收集上述溶液中清亮的棕黄色上清液，弃去沉淀；

d、加入3倍上述上清液体积的丙酮溶液，以14000rpm离心10 min，弃去上清液，收集沉淀；

e、将上述收集的沉淀干燥后，溶于去离子水中，用碳酸钠溶液调节pH至7.0；

f、将调节pH值后的溶液于4℃、12000rpm离心30min，收集上清液；

g、将f中收集的上清液加入到透析袋中透析48h，去除杂质，得到纯化的水溶性碳量子点溶液；

2）利用上述碳量子点溶液制取P24碳量子点偶联抗体，其步骤如下：

h、将P24抗体加入EDC和NHS混合溶液中，室温反应30min；

i、向上述混合溶液中加入巯基乙醇，淬灭未反应的EDC；

j、加入等体积的g中纯化的水溶性碳量子点溶液，室温下反应2h；

k、接着加入BSA溶液与NH4Cl溶液，室温放置10min；

n、最后用PBS透析除去未偶联的抗体及游离NHS，得到P24碳量子点偶联抗体；

3）将玻璃纤维膜放入含有蔗糖、BSA、吐温的磷酸缓冲液中浸透，取出干燥后放入上述制取的P24碳量子点偶联抗体中浸泡10 min，再取出晾干，得到P24碳量子点垫；

4）待上述P24碳量子点垫干燥后，4℃保存。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：上述（1）中P24硝酸纤维素膜制备是在硝酸纤维素膜上均匀地喷上分别针对Test区和Control区的P24抗体和羊抗鼠IgG，室温下干燥后用适当浓度的BSA溶液进行封闭，然后用Na2HPO4洗涤液漂洗三次，室温下充分干燥后，4℃保存。