[发明专利]一种用于高效生产海藻糖的基因工程菌

权利要求书

1.一种用于高效生产海藻糖的基因工程菌，其特征在于，保藏号为CCTCCNO：M2013237。

2.如权利要求1所述的基因工程菌的应用，其特征在于，用于生产海藻糖。

3.一种高效生产海藻糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

A）将权利要求1中所述的基因工程菌进行发酵培养，收集菌体细胞；

B）破碎菌体细胞，释放出MTSase和MTHase，得到包含这两种酶的水溶液；

C）将包含上述两种酶的水溶液用于将直链淀粉或直链糊精转化为海藻糖。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤A）包括：

a、种子培养

将权利要求1中所述的基因工程菌接种至种子培养基，30～37℃振荡培养3～12小时，待种子培养基OD600=0.5～2时，按照0.5～5%的比例接种至发酵培养基；

b、发酵培养

先在35～37℃振荡培养2～12小时，然后加入终浓度50～500μM的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷，再于22～30℃继续振荡培养15～24小时，收集菌体细胞。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述种子培养基的组成如下：蛋白胨5～10g/L，酵母粉5～10g/L，氯化钠2～10g/L。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基包括氮源、碳源、无机盐，所述氮源包括酵母浸膏、酵母提取物、酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、铵盐、硝酸盐，所述碳源包括葡萄糖、甘油、淀粉糖浆、玉米浆，所述无机盐包括氯化钠、磷酸盐、硫酸镁以及锰、锌、铁、铜元素的盐类。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基的组成如下：蛋白胨12g/L，酵母粉24g/L，三水磷酸氢二钾16.7g/L，磷酸二氢钾2.31g/L，甘油5g/L。

8.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤B）中所述破碎菌体的方法包括：超声波处理、反复冻融、加压减压处理、表面活性剂或酶处理。

9.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤C）包括：配制浓度为10～30%的直链淀粉或直链糊精溶液，加入步骤B）中得到的包含MTSase和MTHase的水溶液，维持温度30～50℃，pH6.0～8.0，当生成的海藻糖浓度达到要求时，加入糖化酶处理，最终得到海藻糖的溶液。