[发明专利]L-谷氨酸类氨基酸生产微生物以及氨基酸的生产方法有效
申请号: | 201310299697.2 | 申请日: | 2008-03-14 |
公开(公告)号: | CN103396976A | 公开(公告)日: | 2013-11-20 |
发明(设计)人: | 白神清三郎;村山典子;泉井裕;伊藤久生;安枝寿;臼田佳弘;松井和彦 | 申请(专利权)人: | 味之素株式会社 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P13/14;C12P13/24;C12P13/10;C12R1/15 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 钟鸣 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 谷氨酸 氨基酸 生产 微生物 以及 方法 | ||
1.一种微生物,所述微生物具有生产选自L-谷氨酸、L-谷氨酰胺、L-脯氨酸、L-鸟氨酸、L-瓜氨酸和L-精氨酸中的1种或2种以上的L-氨基酸的能力,并且经过修饰而增加了α-酮戊二酸合酶的活性。
2.权利要求1所述的微生物,其中,所述α-酮戊二酸合酶的活性是通过增加编码α-酮戊二酸合酶的基因的表达量和/或增加该基因的翻译量而增加的。
3.权利要求2的微生物,其中,所述α-酮戊二酸合酶的活性是通过提高编码α-酮戊二酸合酶的基因的拷贝数或者修饰该基因的表达调节序列而增加的。
4.权利要求2或3所述的微生物,其中,所述编码α-酮戊二酸合酶的基因编码下述(A)~(D)中任一项所示的多肽,以及(E)~(H)中任一项所示的多肽:
(A)包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的多肽;
(B)包含在SEQ ID NO:2中取代、缺失、插入或添加了1个或数个氨基酸而得到的氨基酸序列的多肽,且所述多肽与(E)~(H)中任一项所示的多肽一起构成具有α-酮戊二酸合酶活性的蛋白质;
(C)包含SEQ ID NO:58所示的氨基酸序列的多肽;
(D)包含在SEQ ID NO:58中取代、缺失、插入或添加了1个或数个氨基酸而得到的氨基酸序列的多肽,且所述多肽与(E)~(H)中任一项所示的多肽一起构成具有α-酮戊二酸合酶活性的蛋白质;
(E)包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列的多肽;
(F)包含在SEQ ID NO:4中取代、缺失、插入或添加了1个或数个氨基酸而得到的氨基酸序列的多肽,且所述多肽与(A)~(D)中任一项所示的多肽一起构成具有α-酮戊二酸合酶活性的蛋白质;
(G)包含SEQ ID NO:60所示的氨基酸序列的多肽;
(H)包含在SEQ ID NO:60中取代、缺失、插入或添加了1个或数个氨基酸而得到的氨基酸序列的多肽,且所述多肽与(A)~(D)中任一项所示的多肽一起构成具有α-酮戊二酸合酶活性的蛋白质。
5.权利要求2或3所述的微生物,其中,所述编码α-酮戊二酸合酶的基因包含下述(a)~(d)中任一项的DNA,以及(e)~(h)中任一项的DNA:
(a)具有SEQ ID NO:1所示的碱基序列的DNA;
(b)在严格条件下与SEQ ID NO:1所示的碱基序列的互补序列或者能够由该碱基序列制备的探针杂交的DNA,且所述DNA编码这样的多肽,所述多肽与(e)~(h)中任一项的DNA所编码的多肽一起构成具有α-酮戊二酸合酶活性的蛋白质;
(c)具有SEQ ID NO:57所示的碱基序列的DNA;
(d)在严格条件下与SEQ ID NO:57所示的碱基序列的互补序列或者能够由该碱基序列制备的探针杂交的DNA,且所述DNA编码这样的多肽,所述多肽与(e)~(h)中任一项所编码的多肽一起构成具有α-酮戊二酸合酶活性的蛋白质;
(e)具有SEQ ID NO:3所示的碱基序列的DNA;
(f)在严格条件下与SEQ ID NO:3所示的碱基序列的互补序列或者能够由该碱基序列制备的探针杂交的DNA,且所述DNA编码这样的多肽,所述多肽与(a)~(d)中任一项的DNA所编码的多肽一起构成具有α-酮戊二酸合酶活性的蛋白质;
(g)具有SEQ ID NO:59所示的碱基序列的DNA;
(h)在严格条件下与SEQ ID NO:59所示的碱基序列的互补序列或者与能够由该碱基序列制备的探针杂交的DNA,且所述DNA编码这样的多肽,所述多肽与(a)~(d)中任一项的DNA所编码的多肽一起构成具有α-酮戊二酸合酶活性的蛋白质。
6.权利要求1-5中任一项所述的微生物,其中,该微生物经过修饰而增加了铁氧还蛋白-NADP+还原酶的活性。
7.权利要求1-6中任一项所述的微生物,其中,该微生物经过修饰而增加了丙酮酸合酶的活性。
8.权利要求1-7中任一项所述的微生物,其中,该微生物经过修饰而提高了生产铁氧还蛋白或黄素氧还蛋白的能力。
9.权利要求1-8中任一项所述的微生物,其中,该微生物经过修饰而降低了α-酮戊二酸脱氢酶活性。
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