[发明专利]一种受黄嘌呤调控的启动子A及其重组表达载体和应用有效
申请号: | 201310300305.X | 申请日: | 2013-07-17 |
公开(公告)号: | CN104278031B | 公开(公告)日: | 2017-02-08 |
发明(设计)人: | 梁朝宁;邢建民 | 申请(专利权)人: | 中国科学院过程工程研究所 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/63;C12N1/21;C12N5/10;G01N21/64 |
代理公司: | 北京法思腾知识产权代理有限公司11318 | 代理人: | 杨小蓉,杨青 |
地址: | 100190 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 黄嘌呤 调控 启动子 及其 重组 表达 载体 应用 | ||
1.一种受黄嘌呤调控的启动子A,其特征在于,所述启动子A的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种用于黄嘌呤诱导的DNA片段,其特征在于,所述DNA片段包括权利要求1所述的受黄嘌呤调控的启动子A、调控蛋白HucR的编码基因、转运蛋白YgfU的编码基因、驱动调控蛋白HucR的编码基因和转运蛋白YgfU的编码基因表达的启动子CP6以及红色荧光蛋白基因,所述DNA片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种用于黄嘌呤诱导表达蛋白的重组表达载体,其特征在于,包括权利要求1所述的启动子A。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体,其特征在于,所述表达载体为质粒SHY,包括权利要求2所述的DNA片段,所述质粒SHY的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
5.包含权利要求3或4所述重组表达载体的重组菌株。
6.根据权利要求5所述的重组菌株,其特征在于,所述菌株为大肠杆菌。
7.一种受黄嘌呤诱导表达蛋白的转基因细胞系,其特征在于,包括权利要求1所述的受黄嘌呤调控的启动子A。
8.一种受黄嘌呤诱导表达蛋白的方法,包括以下步骤:
1)将目的蛋白的编码基因通过权利要求3或4所述的重组表达载体导入宿主菌中,得到重组菌;
2)在含有黄嘌呤的培养基中发酵上述重组菌,实现黄嘌呤诱导目的蛋白表达。
9.权利要求1所述启动子A在黄嘌呤诱导目的蛋白表达或黄嘌呤生物型检测中的应用。
10.权利要求2所述DNA片段在黄嘌呤诱导目的蛋白表达或黄嘌呤生物型检测中的应用。
11.权利要求3或4所述重组表达载体在黄嘌呤诱导目的蛋白表达或黄嘌呤生物型检测中的应用。
12.权利要求5或6所述重组菌株在黄嘌呤诱导目的蛋白表达或黄嘌呤生物型检测中的应用。
13.权利要求7所述转基因细胞系在黄嘌呤诱导目的蛋白表达或黄嘌呤生物型检测中的应用。
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