[发明专利]用抗体阵列选择乳腺癌治疗药物

权利要求书

1.一种检测截短受体存在的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)将细胞提取物与多个全长受体胞外域(ECD)结合区特异性珠一起培育；

(b)从细胞提取物中除去多个珠，从而除去全长受体，形成缺乏全长受体的细胞提取物；

(c)将不含全长受体的细胞提取物与多个捕捉抗体一起培育，形成多个被捕获的截短受体，其中所述多个捕捉抗体是所述截短受体胞内域(ICD)结合区的特异性抗体，所述多个捕捉抗体束缚于固体支持物上；

(d)将多个被捕获截短受体与相应截短受体的特异性检测抗体一起培育，形成多个可检测的被捕获截短受体；

(e)将多个可检测的被捕获截短受体与信号放大对的第一和第二成员一起培育，产生放大的信号；和

(f)检测信号放大对第一和第二成员产生的放大信号。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述截短受体是p95ErbB2。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述全长受体是ErbB2(HER-2)。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述多个胞外域(ECD)结合区特异性珠包含链霉抗生物素蛋白-生物素对，其中所述链霉抗生物素蛋白附着于珠，生物素附着于抗体。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述抗体是全长受体ECD结合区的特异性抗体。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，通过裂解乳腺肿瘤循环细胞产生所述细胞提取物。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，通过免疫磁性分离法，分离样品中的循环细胞。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述样品选自：全血、血清、血浆、导管洗出液、乳头抽吸物、淋巴、骨髓抽吸物、尿液、唾液、细针抽吸物和它们的组合。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，通过裂解分离自肿瘤组织的细胞产生所述细胞提取物。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述肿瘤组织是原发性肿瘤或转移性肿瘤组织。

11.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述细胞是从肿瘤组织细针抽吸物样品分离的细胞。

12.如权利要求7或9所述的方法，其特征在于，用生长因子体外刺激所述分离的细胞。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述分离细胞用生长因子刺激之前与抗癌药一起培育。

14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述抗癌药选自：单克隆抗体、酪氨酸激酶抑制剂、化疗剂、激素治疗剂、放疗剂、疫苗和它们的组合。

15.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述多个可检测的被捕获截短受体活化状态是可询问的。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述活化状态选自：磷酸化状态、遍在蛋白化状态、复合状态和它们的组合。

17.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测抗体包含结合对的第一成员。

18.如权利要求17所述的方法，其特征在于，所述结合对第一成员是生物素。

19.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述信号放大对第一成员包含结合对第二成员。

20.如权利要求19所述的方法，其特征在于，所述结合对第二成员是链霉抗生物素蛋白。

21.如权利要求20所述的方法，其特征在于，所述信号放大对第一成员是过氧化物酶。

22.如权利要求21所述的方法，其特征在于，所述过氧化物酶是辣根过氧化物酶(HRP)。

23.如权利要求21所述的方法，其特征在于，所述信号放大对第二成员是酪酰胺试剂。

24.如权利要求23所述的方法，其特征在于，所述酪酰胺试剂是生物素-酪酰胺。

25.如权利要求24所述的方法，其特征在于，通过过氧化物酶氧化生物素-酪酰胺产生活化的酪酰胺而产生所述放大信号。

26.如权利要求25所述的方法，其特征在于，直接检测活化的酪酰胺。