[发明专利]负载维生素C的丝素蛋白/透明质酸复合纳米纤维的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及纳米纤维制备技术领域，具体涉及一种负载维生素C（简称维C）的丝素蛋白/透明质酸复合纳米纤维的制备方法。

背景技术

丝素蛋白是一种自然界存在非常丰富的天然蛋白质，具有良好的生物相容性、生物可降解性、良好的透气、透湿性、无免疫原性等优异的性能，近年来被广泛应用于组织工程领域。丝素蛋白纳米纤维的高孔隙率、高比表面积及良好的透湿和透气性能成为皮肤组织再生和伤口治愈的优选材料。Min等发现人体角质细胞和成纤维细胞在丝素蛋白纳米纤维上有很好的黏附和扩散。在伤口治愈的研究中，比较丝素蛋白纳米纤维、微米纤维和膜对人体口腔上皮细胞的影响，发现纳米纤维更能促进人体口腔上皮细胞的黏附和扩散。

中国专利CN101187089A公开了一种丝素蛋白纳米纤维血管支架的制备方法,是首先将丝素蛋白硫酸化，然后用有机溶剂溶解，然后静电纺丝得到纳米纤维用于血管支架。中国专利CN1818163A公开了一种丝素蛋白与聚乙烯醇共混纳米纤维及制备方法，是以甲酸为溶剂，再加入多元醇的方法制备共混纳米纤维。中国专利CN101187089A公开了丝素蛋白与聚乙烯醇共混抗菌纳米纤维及其制备方法，是在丝素蛋白与聚乙烯醇的共混溶液里加入硝酸银溶液进行静电纺丝，然后进行加热处理得到具有抗菌性能的纳米纤维。

近年来人们发现多种维生素与伤口愈合、皮肤的健康有密切关系。中国专利CN101736430A中公开了一种负载有维生素C的丝素蛋白纳米纤维的制备方法， 其纤维具有护肤功效。专利CN102560887A和CN1022560888A中公开了负载维生素E和同时负载维生素A和维生素E的丝素蛋白纳米纤维的制备方法，用于人工皮肤、医用敷料、止血材料、护肤产品等。

然而天然细胞外基质是由纳米纤维网络结构的蛋白质和多糖组成，添加单一的天然蛋白质不能在组成上模拟细胞外基质的成分。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种负载维生素C的丝素蛋白/透明质酸复合纳米纤维的制备方法，该方法制备出的纳米纤维能在组成上模拟细胞外基质的成分，赋予纳米纤维优异的生理功能。

本发明所采用的技术方案为：

一种负载维生素C的丝素蛋白/透明质酸复合纳米纤维的制备方法，具体操作步骤如下：

（1）制备丝素蛋白溶液：将丝素蛋白溶于去离子水中，室温下充分搅拌至完全溶解，得到质量百分比为30-35%的丝素蛋白溶液；

（2）制备透明质酸溶液：将透明质酸溶于去离子水中，室温下充分搅拌至完全溶解，得到质量百分比为2-4%的透明质酸溶液；

（3）制备丝素蛋白和透明质酸混合溶液：将步骤（1）得到的丝素蛋白溶液和步骤（2）得到的透明质酸溶液混合，得到丝素蛋白/透明质酸混合溶液；

（4）将维生素C磷酸酯钠溶于步骤（3）得到的丝素蛋白/透明质酸混合溶液中，充分搅拌均匀得到共混静电纺丝液；

（5）将步骤（4）得到的共混静电纺丝液通过静电纺丝，得到负载维生素C的丝素蛋白/透明质酸复合纳米纤维。

所述步骤（3）中的丝素蛋白溶液与透明质酸溶液的质量比为（9:1）-（7:3）。

所述步骤（4）中维生素C磷酸酯钠在丝素蛋白/透明质酸混合溶液中的质量分数为0.5-2.0%。

所述步骤（5）中静电纺丝的参数为：纺丝电压16-20千伏，纺丝速率0.3-1.0毫升/小时，接收距离120-200毫米。

透明质酸(又称玻尿酸)是存在于生物组织中细胞外基质中的一种酸性黏多糖，是由葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖的双糖单位反复交替连接构成的线性大分子黏多糖，具有良好的生物相容性、生物可降解性及高黏弹性，具有特殊的保水作用，被称为理想的天然保湿因子，并能与细胞表面某些特异受体专一性结合，其中皮肤中就含有大量的透明质酸，所以透明质酸被广泛用于组织工程、伤口敷料、保健护肤品。

维生素C是卓越的抗氧化剂，可以帮助减少自由基对皮肤的损害，有助于减少皱纹并改善皮肤结构，能促进体内胶原蛋白及黏多糖的合成，增加毛细血管的致密性，减低其脆性与通透性，参与体内氧化还原反应，有解毒作用，且有抗组织胺的作用及阻止致癌物质（亚硝胺）的形成，参与免疫，增强细胞防御功能，可促进伤口愈合。