[发明专利]miRNA用于制备治疗原发性醛固酮增多症腺瘤的药物和诊断试剂

说明书

技术领域

本发明涉及医药和生物技术领域，具体为用miRNA制备和筛选治疗原发性醛固酮增多症腺瘤的药物及诊断试剂。

背景技术

1954年4月，密歇根大学的医学教授Jerome W.Conn面对一位表现为高血压、严重低血钾伴明显神经肌肉症状，被诊断为“失钾性肾炎”的女性患者，根据他对肾上腺的病理生理研究，报道了世界上首例原发性醛固酮增多症(原醛症)，继而分泌醛固酮的肾上腺瘤疾病也被命名为Conn’s综合征。1957年，上海瑞金医院邝安堃、陈家伦教授等诊断和报道了中国第一例原醛症。在过去几十年，原醛症一直被认为是一种罕见的肾上腺疾病，在高血压人群中患病率可能低于1%～2%。尽管Conn曾根据其收集的145份病例提出高达20%原发性高血压病人可能是原发性醛固酮增多症，但该调查并未受到重视。1981年日本学者Hiramatsu首次提出了以相对稳定的醛固酮/肾素活性，即ARR（Aldosterone-renin ratio）进行原醛症的筛查，显著提高了人群检出率，并使得学者对于原醛症有了新的认识与了解。目前已有的原醛症高血压发病率研究等报道其在一般高血压患者中患病率约占5～13%，在难治性高血压患者中，原醛症患病率更高达17%-23%。这些数据表明，原醛症实际上是一种常见的肾上腺疾病，其已成为内分泌源性高血压的第一大原因，继发性高血压中的最常见病因。而且，相对于原发性高血压患者，原醛症患者的心、肾、血管等高血压靶器官的损害更为严重，发生心肌肥厚、舒张功能障碍、心力衰竭和肾功能受损的风险更。因此，对原醛症的诊断、治疗以及发生、发展机制的深入研究不仅是肾上腺疾病相关领域，也是内分泌和高血压疾病的研究领域中十分重要的问题。

原醛症分为五种类型，其中双侧特发性醛固酮增多症（idiopathic hyperaldosteronism,IHA）及醛固酮瘤（aldosterone-producing adenoma,APA）为最常见的亚型，两者之和约占原醛症各亚型总和的90%左右，单侧肾上腺增生或原发性肾上腺皮质增生症（primary adrenal hyperplasia,PAH）较少见，家族性醛固酮增多症（familial hyperaldosteronism,FH）及分泌醛固酮的肾上腺皮质癌则较罕见。目前，原醛症患者的分型诊断仍是临床上的难点，且在很大程度上影响了治疗方案的选择。根据临床指南，原醛症的分型诊断主要依靠肾上腺CT、体位试验及双侧肾上腺静脉采血(adrenal venous sampling,AVS)。肾上腺CT对诊断醛固酮瘤的敏感性及特异性分别为70-80%和60-70%，而体位试验的诊断敏感性及特异性较低，虽然AVS的敏感性及特异性高达90%，但其只能作为判定双侧肾上腺有无优势分泌的依据，并不能作为诊断醛固酮瘤的金标准。诊断方法和技术上的不足，导致原醛症筛查和诊断过程复杂且成本较高，部分患者可能由于诊断和分型困难而漏诊或影响治疗效果和预后。因此，探索原醛症相关分子生物标志物和创新性的诊断方法，以及通过分子机制研究探索原醛症治疗和预后的新技术是现在迫切需要解决的问题。

相对于其它常见肾上腺和内分泌相关疾病，原发性醛固酮增多症的基础研究报道较少，其发生发展的分子及遗传机制也尚不清楚。有研究报道了基因多态性，融合基因产生及染色体7p22候选基因改变等与原醛症之间的关系。另有研究证实醛固酮瘤患者在进行一系列激发试验后，相当一部分会出现醛固酮水平的异常升高，同时肿瘤组织中也发现LHR、MC2R、AVPR、GIPR、5-HT4R的异常表达，推测异位受体的异常表达可能与醛固酮瘤的发生相关。Choi等研究者利用外显子测序技术对22个外周血和组织配对的醛固酮瘤标本进行基因突变的筛选，结果发现了钾通道基因(KCNJ5)的突变可导致肾上腺细胞钠离子内流增加，细胞去极化引起电压门控钙通道开放，胞内钙离子浓度的升高增加醛固酮合成酶的表达，促使原醛症发生。不仅如此，携带有KCNJ5突变的APA患者在AVS检测中发现其醛固酮分泌较无突变者明显增加。但在不同的研究中，KCNJ5在原醛腺瘤中的突变率变异较大(波动于14%-100%)。同时其他钾通道蛋白的功能研究，如TASK-1，TASK-3等也提示可能同原醛症中激素的高分泌相关。最近，同样是通过外显子测序，Beuschlein等人发现在APA患者中存在ATP酶的体细胞基因突变，该突变同醛固酮的自分泌增强相关。尽管上述研究从不同侧面解释了原醛症中醛固酮高分泌的机制，但这些未能解释肾上腺组织增生及腺瘤形成的具体原因，提示原醛症和醛固酮瘤发生和发展的分子机制仍需要进一步的大量研究，其中引起同一疾病不同表型和预后差异的精确机制是十分重要的问题。