[发明专利]一种与小麦千粒重相关的分子标记及其应用

权利要求书

1.一种利用小麦多态性位点鉴定或辅助鉴定小麦基因型的方法，所述多态性位点为X和Y两个单核苷酸多态性位点，所述X和Y两个单核苷酸多态性位点分别对应于小麦基因组DNA中序列表序列1自5’末端第1371位和第2450位；

所述X和Y两个单核苷酸多态性位点依次为下述Ⅰ）、Ⅱ）和Ⅲ）的情况时相对应的基因型为A、B和C：

Ⅰ）G/G和G/G；

Ⅱ）G/G和A/A；

Ⅲ）A/A和G/G。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述获得基因型A、B和C的方法包括对待测小麦的基因组DNA中任意一段包括所述2个单核苷酸多态性位点X和Y在内的DNA片段进行PCR扩增，并将该PCR扩增产物进行酶切鉴定的步骤。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增的靶序列为序列表序列1自5’末端第1—2663bp。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增使用的特异性引物对为序列表序列2所示的单链DNA和序列表序列3所示的单链DNA。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述酶切鉴定包括如下步骤：将PCR产物分别用MboII和BsgI酶切，获得酶切产物M和酶切产物B；

若所述酶切产物M为762bp、681bp、465bp、375bp、225bp和155bp的DNA片段，则所述待测小麦在所述X位点为G/G；

若所述酶切产物M为1137bp、681bp、465bp、225bp和155bp的DNA片段，则所述待测小麦在所述X位点为A/A；

若所述酶切产物B为1955bp、510bp和198bp的DNA片段，则所述待测小麦在所述Y位点为G/G；

若所述酶切产物B为1955bp和708bp的DNA片段，则将所述待测小麦候选为在所述Y位点为A/A。

6.权利要求1—5中任一所述方法在鉴定或辅助鉴定小麦千粒重性状中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：

被确定为基因型为C的待测小麦，其千粒重高于被确定为基因型为A和B的待测小麦；被确定为基因型为A的待测小麦，其千粒重高于被确定为基因型为B的待测小麦。

8.扩增如下DNA片段的PCR引物对：小麦基因组DNA上的任意一段包括所述X和Y两个单核苷酸多态性位点在内的DNA片段。

9.根据权利要求8所述的PCR引物对，其特征在于：所述PCR引物对为序列表序列2所示的单链DNA和序列表序列3所示的单链DNA。

10.一种鉴别或辅助鉴别小麦千粒重性状的试剂或试剂盒，其特征在于：所述试剂或试剂盒包括序列表序列2所示的单链DNA、序列表序列3所示的单链DNA、和限制性内切酶MboII和BsgI。