[发明专利]一种高通量免疫组化检测方法及多样品免疫组化检测板

权利要求书

1.多样品免疫组化检测板，其特征在于，包括固定底座（1）、多孔板（3）；所述固定底座（1）上表面开设有放置载玻片的横向凹槽（2）；固定底座（1）上表面还开设有纵向凹槽（5），所述纵向凹槽（5）与横向凹槽（2）部分重叠，纵向凹槽（5）的尺寸与多孔板（3）的外形相适配，横向凹槽（2）的深度大于纵向凹槽（5）的深度，所述多孔板（3）设置有通孔（7），多孔板（3）的一面覆盖有柔性防水衬层。

2.根据权利要求1所述的多样品免疫组化检测板，其特征在于：所述通孔（7）的数量为2至96个；优选地，所述通孔（7）的数量为24个、36个、48个或96个；

所述通孔（7）分为二组，每组24个并且呈矩阵排布；

所述通孔（7）的形状为圆形或椭圆形或多边形；

所述通孔（7）的孔径为1毫米至5毫米，同组中相邻通孔（7）之间的距离为0.5毫米至3毫米。

3.根据权利要求1所述的多样品免疫组化检测板，其特征在于：在纵向凹槽（5）两端与横向凹槽（2）不重叠的部分分别设置有安装孔（6），在多孔板（3）上设置有与安装孔（6）位置相重叠的固定孔（8）。

4.根据权利要求1所述的多样品免疫组化检测板，其特征在于：所述横向凹槽（2）、纵向凹槽（5）均为矩形，横向凹槽（2）相对于固定底座（1）的侧面一端通透并形成向外的突出部（4）；

优选地，所述突出部（4）的横向尺寸为15毫米。

5.一种细胞组织块制备模具，其特征在于：包括由上到下依次连接的模具框板（1）、防水垫层（2）、模具底板（3）；所述模具框板（1）中央区域为上下通透的通槽（12），所述防水垫层（2）的形状、尺寸与模具框板（1)相同，所述模具底板（3）的外形尺寸与模具框板（1）的外形尺寸相同。

6.根据权利要求5所述的细胞组织块制备模具，其特征在于：所述模具框板（1）外形为矩形，所述通槽（12）为矩形；

所述模具框板（1）、防水垫层（2）、模具底板（3）通过位于四角的螺孔、螺杆连接；所述螺杆直径为3毫米至5毫米。

所述模具框板（1）的厚度为2至10毫米，所述通槽（12）的一边边长为5毫米至50毫米,另一边边长为5毫米至25毫米；所述模具底板（3）的厚度与模具框板（1）的厚度相同。

7.根据权利要求1所述的细胞组织块制备模具，其特征在于：

所述模具框板（1）、模具底板（3）的材料均为工程塑料、胶木、硬木或金属；

所述模具框板（1）、模具底板（3）均为有机玻璃；

所述防水垫层（2）为硅胶、橡胶、软木或塑料制成；

所述防水垫层（2）为模具框板（1）表面喷涂或刷涂的永久性粘胶。

8.一种高通量免疫组化检测方法，其特征在于：采用权利要求1～4任意一项所述检测板检测；包括如下步骤：

（1）待检组织切片的制备：取待检组织，用组织芯片技术制备待检组织切片，切片上各组织的直径、间距和分布位置与多孔板的通孔（7）匹配；

（2）将步骤（1）待检组织切片经脱蜡、水化、抗原修复、封闭处理后，平放入横向凹槽（2）中；

（3）将多孔板（3）放入纵向凹槽（5）中，覆盖有柔性防水衬层一面朝下，固定；

（4）将多种待测抗体溶液加入不同的通孔（7）中，孵育；

（5）取出待检组织切片，二抗反应，显色，封片，观察即可。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：步骤（1）中，待检组织切片为细胞组织块切片时，用如下方法制备：将细胞与琼脂糖凝胶混悬液混匀，加入权利要求5～7任意一项所述细胞组织块制备模具中，待琼脂糖细胞液冷凝，取出，即得细胞组织块，再采用组织芯片技术制备组织块切片；

优选地，通过离心3～8分钟的方式使琼脂糖细胞液冷凝，所述离心时间进一步优选为5分钟。

10.权利要求8或9所述方法在高通量筛选免疫组化检测用单克隆抗体中的用途。