[发明专利]一种四环素菌种选育方法

权利要求书

1.一种四环素菌种选育方法，其特征在于采用琼脂块培养法替代传统的摇瓶培养法，优化、改进了四环素选育的初筛流程。

2.按照权利要求1所述的四环素菌种选育方法，其具体步骤为：生产菌种斜面培养，制备单孢子悬浮液，涂布分离培养出单菌落，挑取单菌点种于固体培养基平板上，原始分离单菌落培养成熟后挑取制备斜面，点种菌落培养成熟后，用HPLC法检测产素能力作为初筛效价，挑取相应初筛高产菌株编号斜面摇瓶复筛，复筛摇瓶效价HPLC法检测，高产菌株复筛留种，高产菌株性能考察，最终留种。

3.按照权利要求2所述的四环素菌种选育方法，其特征在于上述挑取单菌落点种于固体培养基平板上时每个单菌落点种三块。

4.按照权利要求2所述的四环素菌种选育方法，其特征在于上述分离单菌落在32±1℃条件下培养4～5天。

5.按照权利要求2所述的四环素菌种选育方法，其特征在于上述点种单菌落、挑单菌落制备的斜面均在32±1℃条件下培养4～5天。

6.按照权利要求2所述的四环素菌种选育方法，其特征在于上述HPLC法检测产素能力是指点种固体培养基平板培养结束后，将源于同一单菌落的三块琼脂块取下置于不同离心管中，加适量EDTA，充分震荡混合，转速4000rpm离心10min、静置后，经0.45um有机滤膜过滤，收集过滤液，用HPLC法测定单菌落的产素能力。

7.按照权利要求1、2、3、4、5所述的四环素菌种选育方法，其特征在于上述初筛培养基为琼脂块固体培养基。