[发明专利]从油橄榄叶中提取橄榄苦甙的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物活性成分的提取方法，具体涉及从油橄榄叶中提取橄榄苦甙的方法。

背景技术

油橄榄叶为木犀科木犀榄属油橄榄（Olea europae L.）的叶子，油橄榄叶中含有大量的生物活性物质，如裂环烯醚萜类、黄酮及其苷、双黄酮及其苷、低分子单宁等，其中以裂环烯醚萜类为主要活性物质。裂环烯醚萜类是一类苦涩物质，其活性最高的成分为橄榄苦甙（Oleuropein）。

橄榄苦甙是一种双分子结构酚类和黄酮类物质，具有天然的抗氧化、抗肿瘤、延缓衰老、增强心血管功能、治疗慢性前列腺炎、增强免疫力、调节内分泌系统、护肝、抗炎等重要的保健功能，同时还有降血脂、降血糖的药理作用，广泛应用于食品、化妆和生物制药等领域。橄榄苦甙具有强力的抗细菌和抗病毒特性，可用于制造治疗病毒、细菌、原生动物类、寄生虫和吸血虫等所引起的疾病和治疗感冒的药物。橄榄苦甙还可以保护皮肤细胞不受紫外线的伤害，防止紫外线对皮肤膜脂质的分解，促进纤维细胞生成胶原蛋白，减少纤维细胞胶原酶的分泌，组织细胞膜的抗聚糖反应，从而高度保护纤维细胞，自然抵御因氧化而导致的肌肤破坏，更免受UV紫外线伤害，有效维持肌肤柔嫩与弹性，达到护肤、嫩肤的功效。

目前公开的橄榄苦甙的提取分离技术较多，一般采用醇提或碱提法提取橄榄叶中的有效成分，然后进行上柱层析等一系列分离纯化步骤，得到高纯度的橄榄苦甙。如公开号为CN102702287A的发明专利《从橄榄叶中提取纯化橄榄苦甙的方法》，该方法用pH值为8～10的碱液对橄榄叶进行常温浸提，将所得提取液经分子筛型大孔吸附树脂柱层析，然后用体积浓度为50～80%的乙醇洗柱，收集含目标成分的洗脱液，浓缩干燥，得到低含量的橄榄苦甙；再将低含量的橄榄苦甙用极性值为3.8～4.2的极性溶液溶解，抽滤，滤液浓缩，得到浓缩液；再向浓缩液中加入有机溶剂调节极性，低温条件下放置析出晶体，干燥，得到高纯度的橄榄苦甙。碱液提取时碱会使橄榄苦甙水解成羟基洛醇盐，提取时间越久，水解程度越高，最终产品的收率较低，仅为4%左右。当采用乙醇作为溶媒会将植物中的色素、黄酮类、萜类等物质提取出来，提取液中杂质较多，需要浓缩、离心沉淀之后才能上柱，会增加能耗，提高生产成本，不利于大规模工业化生产。同时，乙醇不易让橄榄苦甙在植物中与其他成分相结合的键完全断开，橄榄苦甙的提取率不高，产品的收率一般在2～3%之间。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种从油橄榄叶中提取橄榄苦甙的方法，以该方法制得的橄榄苦甙收率高，纯度大。

本发明提供的技术方案是从油橄榄叶中提取橄榄苦甙的方法，包括以下步骤：

1）取油橄榄叶粉碎，加水煎煮2～3次，每次煎煮至沸腾后维持微沸2～3h，合并煎煮液，过滤，得到滤液；

2）将滤液上大孔吸附树脂柱层析，先用不超过1BV的水洗柱，再用体积浓度为60～70%的乙醇洗柱，收集乙醇洗脱液；

3）向乙醇洗脱液中加入其重量1～1.5‰的活性炭，加热回流脱色20～30min，过滤，将滤液浓缩为15～18波美度的浸膏；

4）向浸膏中加入其3～4倍重量的乙醇，搅拌溶解，然后将溶液浓缩至原体积的1/3～1/2，趁热加入有机溶剂调节极性至4.0～4.1，搅拌，静置冷却，析出晶体，干燥，即为橄榄苦甙。

上述方法中：

步骤1）中，油橄榄叶粉碎至10～30目；水的加入量为油橄榄叶重量的6～8倍。

步骤2）中，所述大孔吸附树脂的型号为HPD-100+。HPD-100+型大孔树脂是申请人根据生产实际需求，在原HPD-100型树脂的基础上调整了平均孔径和比表面积两项技术指标参数得到的，HPD-100+型树脂对橄榄苦甙的吸附及解吸附效果更佳。申请人发现，将HPD-100+型树脂层析后的乙醇洗脱液浓缩干燥，即为粗橄榄苦甙，检测其纯度为50～55%、收率可到14～15%。

HPD-100+型树脂是苯乙烯型非极性共聚体，其技术指标参数如下：

1、产品名称：大孔吸附树脂

2、外观：乳白色不透明球状颗粒

3、粒径范围：（60～16目）0.3～1.25mm≥90%

4、含水量：65～75%

5、比表面积：710-750㎡/g；

6、堆积密度：0.65-0.75g/ml(湿态)

7、湿视密度：0.68-0.7g/ml

8、湿真密度：1.03-1.07g/ml

9、平均孔径：