[发明专利]一种比例型近红外荧光探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种比例型近红外荧光探针，其特征在于，其化学名称为氮杂氟硼二吡咯-硼酸，结构式如下：

2.权利要求1所述的比例型近红外荧光探针的制备方法，其特征在于，该制备方法按如步骤进行：

（1）将1mol4-溴苯乙酮溶于2.44L乙醇中，加入2.5M氢氧化钠水溶液，室温下滴加1mol苯甲醛的乙醇溶液，滴加完毕待有大量固体析出后，室温反应20h，水洗固体，用乙醇重结晶，用乙醇洗涤固体后干燥得到黄色固体1-(4-溴)-3-苯丙烯酮；

（2）将0.75mol的1-(4-溴)-3-苯丙烯酮、3.75mol二乙胺和3.75mol硝基甲烷溶于1L甲醇，回流20h，将反应液体积旋至约1/5，倾入等体积冰水中，用4M浓盐酸调pH至3-4，用二氯甲烷萃取水相，有机相水洗，饱和NaCl洗涤，Na₂SO₄干燥，旋干，加入甲醇，用甲醇冲洗滤饼，再用甲醇重结晶得到1-(4-溴苯)-4-硝基-3-苯丁酮；

（3）将0.39mol1-(4-溴苯)-4-硝基-3-苯丁酮和13.65mol醋酸铵加入到3.5L乙醇中，N₂保护回流，20h后点板原料消失，停止反应，浓缩乙醇，先用四氢呋喃：石油醚体积比=1.5:1，后用甲醇和石油醚洗，得到蓝黑色固体二溴氮杂四苯基二吡咯次甲染料；

（4）将18mmol二溴氮杂四苯基二吡咯次甲染料、63mmol联硼酸频哪醇酯、7.2mmol Pd(dppf)Cl₂、165.24mmol醋酸铵分别加入到500mL四氢呋喃中，氮气下加热回流20h，直到TLC显示反应完全，用石油醚：四氢呋喃体积比=20:1过柱子，得到二频哪醇乙硼烷氮杂四苯基二吡咯次甲染料；

（5）将7.5mmol二频哪醇乙硼烷氮杂四苯基二吡咯次甲染料溶于无水二氯甲烷中，加入75mmol N,N-二异丙基乙基胺，氮气保护，室温搅拌1h，加入112.5mmol三氟化硼乙醚，搅拌4个小时后，制砂过柱，用石油醚：四氢呋喃体积比=3:1纯化得到二频哪醇乙硼烷氮杂BODIPY；

（6）将1.33mmol二频哪醇乙硼烷氮杂BODIPY溶于150mL四氢呋喃中，加入2.8mmol二乙醇胺，30min后待不溶固体析出后，过滤，用250mL THF洗涤固体，再加入560mL HCl，1h后悬浮液变均相溶液，乙酸乙酯萃取干燥，利用甲醇：二氯甲烷体积比=1:20洗脱液经硅胶柱纯化样品，得到氮杂氟硼二吡咯-硼酸。

3.权利要求1所述的比例型近红外荧光探针在检测H₂O₂中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其中，所述H₂O₂在水溶剂中、PVC-DOS膜中或细胞中。