[发明专利]一株产芽孢漆酶的芽孢杆菌及利用该菌产芽孢漆酶的方法有效

专利信息
申请号: 201310315314.6 申请日: 2013-07-25
公开(公告)号: CN103421709A 公开(公告)日: 2013-12-04
发明(设计)人: 汪春蕾;李凡姝;赵敏;崔岱宗;卢磊;李德斌;王天女;陶雷 申请(专利权)人: 东北林业大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N9/02;C12R1/07
代理公司: 哈尔滨市伟晨专利代理事务所(普通合伙) 23209 代理人: 张伟
地址: 150040 *** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要:
搜索关键词: 一株产 芽孢 杆菌 利用 方法
【权利要求书】:

1.一株产芽孢漆酶的芽孢杆菌,其特征在于该菌为芽孢杆菌(Bacillus sp.)CLb,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏日期为2013年6月8日,保藏号为CGMCC No.7683。

2.利用如权利要求1所述的芽孢杆菌CLb产芽孢漆酶的方法,其特征在于该方法按以下步骤进行:

一、将芽孢杆菌CLb划线接种于固体产孢培养基上,37℃倒置培养5d;

二、然后用无菌去离子水将固体产孢培养基上的芽孢冲洗下来,加入终浓度为0.1mg/mL的溶菌酶,37℃水浴10min;

三、然后依次用含有10mmol/L EDTA的1mol/L NaCl溶液、0.14mol/L NaCl溶液和质量浓度为0.1%的SDS分别清洗芽孢一遍;

四、再用无菌去离子水清洗芽孢一遍;

五、将芽孢于80℃水浴热击10min后用无菌去离子水清洗三遍;

六、用去离子水悬浮芽孢,得到芽孢悬液,即为粗酶液;

七、取出500μL芽孢悬液,置于80℃烘箱内烘至恒重,计算出芽孢悬液浓度,并记录,剩余的芽孢悬液放在4℃冰箱中储存备用;

步骤一所述固体产孢培养基由0.04g/L的CuSO4、10g/L的Tryptone、5g/L的Yeast Extract、10g/L的NaCl、17g/L的琼脂和蒸馏水组成。

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