[发明专利]快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的生物传感芯片

权利要求书

1.快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的生物传感芯片，其特征在于：包括以下步骤：

（1）金纳米棒的制备：采用传统的金种生长法（Jana et al, Adv. Mater. 2001, 13, 1389）制备长径比为2-6的金纳米棒；

（2）金纳米棒在玻璃基质上的固定：包括以下三个步骤：

a. 玻璃基质的清洗：将玻璃基质浸入体积比为4：1的浓硫酸与过氧化氢的混合溶液中氧化，然后放入超声仪中超声；所述的浓硫酸的含量大于等于98%；所述的过氧化氢的质量分数大于等于30%；

b. 3-氨丙基三甲氧基硅烷修饰：将清洗后的玻璃基质浸入3-氨丙基三甲氧基硅烷的甲醇溶液中，静置反应2小时，然后用甲醇和去离子水反复冲洗3遍后放入烘箱于120℃下烘2小时；

c. 聚苯乙烯磺酸钠修饰：将上述表面修饰有3-氨丙基三甲氧基硅烷的玻璃基质浸入聚苯乙烯磺酸钠水溶液中，静置反应40-70分钟；

d. 金纳米棒的修饰：将上述修饰有聚苯乙烯磺酸钠的玻璃基质浸入步骤（1）中制备的金纳米棒溶液中，静置反应40-70分钟。

2.（3）核酸探针的固定：将步骤（2）中修饰有金纳米棒的玻璃基质浸入末端修饰有巯基的核酸探针溶液中，静置反应6-12小时； 

根据权利要求1所述的快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的生物传感芯片，其特征在于：所述的步骤（2）中所述的玻璃基质包括各种成份及形状的透明玻璃。

3.根据权利要求1所述的快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的生物传感芯片，其特征在于：所述的步骤（2）b中3-氨丙基三甲氧基硅烷甲醇溶液的质量分数为3%－8%。

4.根据权利要求1所述的快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的生物传感芯片，其特征在于：所述的步骤（2）c中聚苯乙烯磺酸钠水溶液的浓度为15-25 mg/mL。

5.根据权利要求1所述的快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的生物传感芯片，其特征在于：所述的步骤（2）d中使用的金纳米棒溶液中含有80-100 mM的NaCl。

6.根据权利要求1所述的快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的生物传感芯片，其特征在于：所述的步骤（2）中所述的核酸探针的序列为：TGG AAT TGA GCA GCG TTGG。

7.根据权利要求1所述的快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的生物传感芯片，其特征在于：所述步骤（3）中所述的核酸探针浓度为5 mM, 溶解于0.1 M， pH＝7.4 的Tris-HCl缓冲液中。