[发明专利]基于山梨糖醇-多胺聚合物的基因传递系统用于肺癌基因治疗

权利要求书

1.一种非病毒阳离子转基因载体，其特征是SD-SPE二元组成的聚阳离子载体，其结构式如下： 

。

2.权利要求1所述的聚合物阳离子转基因载体的合成方法，其特征是以SD和多胺分子为结构单元，交替连接成聚合物，构建成纳米聚阳离子载体结构，反应式如下： 

反应式中，(1)是SD结构式，(2)是典型的多胺分子：精胺结构式，(3)是最终产物SD-SPE的结构式。 

3.根据权利要求2所述的聚阳离子转基因载体的合成方法，其特征是所述反应步骤如下： 

将SD溶解于重量体积比10-20倍量的二甲基亚砜中，SPE溶解于重量体积比10-20倍量的二甲基亚砜中，SPE与SD的摩尔比例为1∶1-1.5∶1，然后将SD溶液慢慢滴加到SPE溶液中，然后在4-100℃下搅拌24h。所得产物溶解于4℃的去离子水中，然后用截留分子量3500-12000的透析带在4℃下透析24h。最后将SD-SPE聚合物冻干，保存在-20℃下备用。所用到的溶剂是二甲基亚砜，也可以是醇类包括甲醇、乙醇等。 

4.根据权利要求1或2或3所述的聚阳离子转基因载体的合成方法，其特征为：多胺分子包括精胺，亚精胺，二乙烯三胺，三乙烯四胺，四乙烯戊胺，五乙烯六胺，以及低分子量的PEI300，600，1200，1800。 

5.根据权利要求3所述的聚阳离子转基因载体的合成方法，其特征为：SD为两段为双键的山梨糖醇前体，主要山梨糖醇。SD也可以是末端含两个以上的双键的山梨糖醇前体。 

6.根据权利要求3所述的聚阳离子转基因载体的合成方法，其特征为：透析袋的分子量在3500-12000范围内。 

7.根据权利要求3所述的聚阳离子转基因载体的合成方法，其特征为：反应温度在4-100℃范围内。 

8.根据权利要求1或2或3所述的聚阳离子载体作为基因载体的应用。 

9.一种含有权利要求1的聚合物与含报告基因、抗癌基因的能在真核细胞中重组表达的核酸形成的复合物。 

10.权利要求9的复合物，其中所述的核酸含有编码遗传标记的DNA序列，所述的遗传标记选择绿色荧光蛋白基因和Pdcd4基因。 

11.一种转染带有能增加细胞内吞的方法，所述的方法包括使所说的细胞与权利要求9的复合物在一定条件下接触，其中在所述的条件下所说的复合物进入到所说的细胞中并且释放所说的复合物的核酸。 

12.根据权利要求11的方法，其中所述的能增加细胞内吞能力的片段为含有山梨糖醇前体的反应物。 

13.根据权利要求11的方法，其中所述的细胞为肺细胞。 

14.根据权利要求11的方法，其中所述的细胞为肺癌细胞。 

15.一种通过吸入方式给药的基因传递系统，所述的方法包括使所说的模型动物与权利要求9的复合物通过呼吸吸入，将复合物进入到所说的模型动物中并且能发挥治疗作用。 

16.根据权利要求15的方法，其中所说的模型动物为肺肿瘤模型动物K-ras^LA1。