[发明专利]用于检测人类乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因分型的引物组及试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种用于检测ALDH2基因分型的试剂盒。

背景技术

人类乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因位于12号染色体(12q24.2)，它的主要多态性是rs671，即位于外显子12的G1510A。正常的等位基因记为ALDH2*1，单碱基突变的等位基因记为ALDH2*2。ALDH2*2在人类各族群中的分布是不同的，它基本全部出现在亚洲人上。研究显示中国人ALDH2*2的等位基因频率为18％，其中广东汉族最高(31％)，武汉汉族12％，洛阳人15％，上海人25％，台湾人30％。朝鲜人16％，日本人27％，泰国人4％，白人0％，黑人0％。

乙醛脱氢酶是随机组合的四聚体，一个突变型的亚基影响了四聚体的稳定性，进而影响酶的正常表达。ALDH2*2是显性遗传，研究发现携带ALDH2*2的是纯合子(AA)，ALDH2酶无活性，若是杂合子(GA)，ALDH2酶活性只有6％。ALDH2基因多态性对饮酒行为有影响，是酒精性肝硬化，肝癌，鼻咽癌，口腔癌等遗传危险因素，对硝酸甘油指导用药具有参考价值。下面分别加以介绍。

ALDH2与饮酒行为的关系：ALDH2*2突变表达出的亚基的酶无法正常代谢乙醇的氧化产物乙醛，血液乙醛浓度增高，造成一系列饮酒后的不良反应，如脸红、头晕、心跳加快等。而纯合子ALDH2*2/*2酶活性近乎为零，最好是滴酒不沾。有ALDH2*2者更易产生饮酒的不良反应，酗酒的可能性也较小。ALDH2*2/*2纯合子，由于完全不能代谢酒精，不胜酒力，很快就醉倒了，所以反而不会去喝酒，对健康也就不会有什么大的影响。ALDH2*1/*2杂合子，由于还是具有弱的ALDH2活性，经过不断的磨练，会逐渐对乙醛、脸红现象产生耐受，成为习惯性的重度饮酒者。ALDH2检测评估个体酒精代谢能力，指导检测者正确饮酒，避免不当饮酒对身体造成的伤害。ALDH2*2/*2纯合子，由于完全不能代谢酒精，尽量不要饮酒。ALDH2*1/*2杂合子，由于还是具有弱的ALDH2活性，最易形成习惯性的重度饮酒者，尽量不要饮酒。

ALDH2与酒精性肝硬化的关系：流行病理学表明，酗酒是慢性肝病的重要诱因，然而长期酗酒者中，仅10％～20％发展为酒精性肝硬化(alcoholic liver cirrhosis，ALC)。单卵双胞胎与双卵双胞胎相比有较高发生率，提示个体间遗传差异是酗酒者ALC易感性的基础，说明遗传因素对汉族男性ALC易感性有影响。ALDH2*2突变表达出的亚基的酶无法正常代谢乙醇的氧化产物乙醛，血液与肝脏中乙醛浓度增高，长期刺激引起酒精性肝硬化。ALDH2*2等位基因在酗酒组中的频率显著低于它在ALC组中的频率，提示ALDH2*2等位基因会提高其携带者ALC的患病风险。

ALDH2与癌症的关系：酒精在体内的代谢过程主要为乙醇→乙醛→乙酸。乙醛已被证实有明显的致癌作用，而存在于肝细胞中的乙醛脱氢酶2(ALDH2)，它的功能是将乙醛氧化为无致癌作用的乙酸。有研究表明，饮酒后携带ALDH2*2/*2者血液中乙醛的浓度是携带谷氨酸纯合型ALDH2*2/*2的19倍，是谷氨酸赖氨酸杂合型ALDH2*1/*2的19(ALJ))的3倍。ALDH2基因多态性与癌症易感性关系的研究集中在日本进行，结果显示其主要是与胃癌和食管癌的发生有关。研究发现的在携带ALDH2变异基因型饮酒人中，每月饮酒量＞3kg与≤3kg者相比，患肝癌危险性高达7.2倍，乙肝阳性肝癌危险性高达52倍，食道癌危险性高达13倍，口腔癌危险性高达6倍。

ALDH2基因多态性与硝酸甘油代谢：硝酸甘油(GTN，glyceryl trinitrate，nitroglycerin)用于治疗心绞痛和心力衰竭已有130年的历史，舌下含服硝酸甘油片是抗冠心病心绞痛急性发作的常规首选药方。临床有效性常因人而异。有的人因它而及时挽救了生命，而有的人服用之后，效果却不甚明显。研究表明ALDH2基因突变是影响硝酸甘油药物疗效的决定性因素。临床医师在使用硝酸甘油时，需考虑患者的ALDH2基因型遗传因素。通过DNA检测，评估硝酸甘油治疗方案，ALDH2基因型突变可作为硝酸甘油治疗的简单指示标志。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供一种用于检测ALDH2基因分型的引物组。

本发明的第二个目的是：提供一种用于灵敏、特异、经济、简便、快速的特点的用于检测ALDH2基因分型的试剂盒。

一种用于检测人类乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因分型的引物组，其特征包括ALDH2*1引物对、ALDH2*2引物对及内参引物对。