[发明专利]香荚兰豆药材中挥发性成分的分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及药材中化学成分的分析方法，具体地指一种香荚兰豆药材中挥发性成分的分析方法。

背景技术

香荚兰豆为兰科香荚兰属植物香荚兰Vanilla planifoli Andrews的成熟果实，原产于非洲岛国马达加斯加，我国云南西双版纳等地已引进栽培。香荚兰豆具有息风止痉、镇静抗惊等功效。现代研究表明它还具有镇静、抗惊厥、抗氧化及抑菌等药理活性，其主要化学成分为醛类、酚类、萜类、酯类、挥发油、糖类及有机酸等。香荚兰豆是一种名贵的天然食品香料，因其丰满、浓郁的香气而被广泛地应用于医药、食品等领域。

目前，国内对香荚兰豆挥发性成分的提取方法仅见超临界二氧化碳萃取(SFE-CO₂)和同时蒸馏萃取(SDE)法，分析方法多为气相色谱-质谱联用法(GC-MS)。SFE-CO₂法对不同物质的溶解能力差别较大，与物质的极性、沸点和相对分子质量有密切的关系，对于亲脂性成分萃取较完全，对于中等极性成分（如皂苷、黄酮苷）或极性更大的成分无法萃取。而SDE法的蒸馏温度过高，样品可能发生水解、氧化、酯化或热分解，同时高沸点的组分也难以随水蒸气一起蒸出来。所以二者均不能全面反映样品中挥发性成分的真实组成。

另外，因香荚兰的品种、产地和加工方法的差异导致挥发性成分在组成和含量上的差异，难以对香荚兰豆药材质量进行全面客观的评价。

发明内容

本发明的目的就是要克服现有技术所存在的不足，提供一种香荚兰豆药材中挥发性成分的分析方法。

为实现上述目的，本发明所提供的香荚兰豆药材中挥发性成分的分析方法，它包括以下步骤：

(a)顶空固相微萃取提取挥发性成分：

取香荚兰豆原药材2.0g，剪碎，置于固相微萃取仪顶空瓶中，用带有65μm聚二甲基硅氧烷-二乙烯基苯萃取纤维头的手动进样器插入瓶内，90℃平衡30min，再顶空萃取20min，取出，立即插入气相色谱仪进样口，进样口温度为250℃，解吸3min，进样模式为不分流进样；

(b)气相色谱-质谱联用分析条件：

色谱条件：色谱柱：HP-5MS石英毛细管柱，其尺寸为50m×0.2mm×0.33μm；程序升温：初始温度30℃，以2℃/min升温至80℃，保留2min，再以10℃/min升温至250℃，保留5min；进样口温度：250℃；载气：高纯氦气；载气流速：1.0mL/min；

质谱条件：离子源：EI源；离子源温度：230℃；四级杆温度：150℃；电子能量：70eV；倍增管电压：1.2kV；接口温度：280℃；质量范围：35～550m/z；

(c)挥发性成分的定性及定量分析：

定性分析通过化学工作站检索NIST标准质谱图库，同时结合有关质谱图文献解析，确认香荚兰豆挥发性成分；定量分析通过化学工作站数据处理系统，按峰面积归一化法进行计算，求出各组分的相对百分含量。

顶空固相微萃取法(英文简称为HS-SPME)具有萃取速度快、操作简便、富集效率高的特点。

本发明采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用法(即HS-SPME-GC-MS)对香荚兰豆药材中挥发性成分进行了提取与分析，共分离出32个峰，确定了其中28个组分，香荚兰豆挥发性成分中，主要为醛类，还含有酚类、醇类、酸类、酯类、酮类、烯烃类等，其中含量最高的为香兰素(48.28%)，其次为愈创木酚(15.54%)，这2种化合物的含量占挥发性成分总量的63.82%。

本发明首次采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用法(HS-SPME-GC-MS)对香荚兰豆药材中挥发性成分进行提取与分析，弥补了以往提取方法对挥发性成分提取不完全的缺点，为该药材挥发性成分的分离分析提供更为全面的检测方法。

附图说明

图1为香荚兰豆中挥发性成分GC-MS总离子流图。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例对本发明作进一步的详细描述。

实施例1

(a)顶空固相微萃取(HS-SPME)提取挥发性成分：

取香荚兰豆原药材2.0g，剪碎，置于固相微萃取仪顶空瓶中，用带有65μm聚二甲基硅氧烷-二乙烯基苯(PDMS-DVB)萃取纤维头的手动进样器插入瓶内，90℃平衡30min，再顶空萃取20min，取出，立即插入气相色谱仪进样口(温度250℃)；解吸3min；进样模式为不分流进样。

(b)气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析条件：