[发明专利]抗炎蛋白TIPE2在制备治疗动脉粥样硬化的药物中的应用

权利要求书

1.抗炎蛋白TIPE2在制备治疗动脉粥样硬化性疾病的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述动脉粥样硬化性疾病是以动脉粥样硬化斑块形成为病理学基础的心脑血管疾病。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述动脉粥样硬化性疾病包括急性冠脉综合征、心绞痛、脑中风、血栓形成、血管闭塞、脑缺血等疾病。

4.一种表达TIPE2的重组腺病毒，其特征在于：是通过以下制备方法得到的：

BamH I and Xho I双酶切pRK5-TIPE2质粒及pShuttle-GFP-CMV穿梭质粒，回收TIPE2目的片段及穿梭载体，酶连获得pShuttle-GFP-CMV-TIPE2质粒；之后用限制性内切酶I-Ceu Ⅰ和I-Sce Ⅰ双酶切pADxsi骨架质粒与pShuttle-GFP-CMV-TIPE2质粒，并将目的片段与pADxsi酶连，产物转化DH5 α进行细菌内同源重组，筛选后的阳性克隆大量扩增获得pADxsi-GFP-CMV-TIPE2重组腺病毒质粒；

Pac I酶切线性化重组腺病毒质粒后，用Lipofectamine 2000脂质体转染覆盖率80%的包装细胞HEK293细胞，3-5d后，出现明显噬斑；待90%的细胞出现细胞病变时，收集细胞上清，反复冻融3次以后离心收集上清，继续感染HEK293细胞，扩增病毒，收集病毒液纯化后于液氮保存。

5.权利要求以4所述的表达TIPE2的重组腺病毒的制备方法，其特征在于：步骤如下：

BamH I and Xho I双酶切pRK5-TIPE2质粒及pShuttle-GFP-CMV穿梭质粒，回收TIPE2目的片段及穿梭载体，酶连获得pShuttle-GFP-CMV-TIPE2质粒；之后用限制性内切酶I-Ceu Ⅰ和I-Sce Ⅰ双酶切pADxsi骨架质粒与pShuttle-GFP-CMV-TIPE2质粒，并将目的片段与pADxsi酶连，产物转化DH5 α进行细菌内同源重组，筛选后的阳性克隆大量扩增获得pADxsi-GFP-CMV-TIPE2重组腺病毒质粒；

Pac I酶切线性化重组腺病毒质粒后，用Lipofectamine 2000脂质体转染覆盖率80%的包装细胞HEK 293细胞，3-5d后，出现明显噬斑；待90%的细胞出现细胞病变时，收集细胞上清，反复冻融3次以后离心收集上清，继续感染HEK 293细胞，扩增病毒，收集病毒液纯化后于液氮保存。

6.权利要求以4所述的表达TIPE2的重组腺病毒在制备预防动脉粥样硬化性疾病的药物中的应用。

7.权利要求以4所述的表达TIPE2的重组腺病毒在制备治疗动脉粥样硬化性疾病的药物中的应用。

8.权利要求以4所述的表达TIPE2的重组腺病毒在制备防治心脑血管疾病的药物中的应用。

9.以权利要求4所述的表达TIPE2的重组腺病毒为基础的TIPE2蛋白、由TIPE2衍生出的一系列肽、基因产物在制备防治心脑血管疾病的药物中的应用。

10.以权利要求4所述的表达TIPE2的重组腺病毒为基础的TIPE2蛋白、由TIPE2衍生出的一系列肽、基因产物在制备治疗以动脉粥样硬化斑块形成为病理学基础的心脑血管疾病中的应用。