[发明专利]一种利用介电频谱特性鉴别胃癌腺上皮细胞的方法

说明书

技术领域

本发明涉及胃癌细胞鉴别方法，尤其是涉及一种利用介电频谱特性鉴别胃癌腺上皮细胞的方法。

背景技术

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤，其发病率和死亡率均居各种恶性肿瘤之首。中国胃癌死亡率属世界高死亡率水平，男性为欧美发达国家的4.2～7.9倍，女性为3.8～8.0倍。因此，胃癌是恶性肿瘤防治的重点，积极开展胃癌的基础理论和临床应用研究，揭示其发病机制，寻找有效的诊治方法，具有重要的现实意义。目前可用于辅助胃癌诊断方法：内窥镜（胃镜）镜及病理评价，脱落细胞学检查，X线钡餐造影，B超检查，CT扫描，磁共振成像MRI检查，血清胃蛋白酶原(PGI,PGII)检测等。其中，胃镜检查是临床最常用的胃癌诊断方法，它主要依靠视觉观察胃粘膜形态变化，对高怀疑区域，通过胃镜对可疑组织活检取样，再进行病理学诊断，目前病理学诊断仍为金标准，但存在以下缺点：1）依靠形态病理学变化作为诊断标准，肿瘤已发展到中晚期；2）组织活检具有损伤性。

因此，国内外学者都在探索各种方法和手段，寻找胃癌早期诊断方法和非损伤性诊断技术。其中，依据胃癌组织细胞电特性改变，对肿瘤细胞的早期辅助诊断就是一种选择，其主要原因在于组织细胞电学特性变化早于其形态学改变。因此，探索胃癌腺上皮细胞电学特征参数改变，通过这些改变的特征参数，实现对胃癌早期辅助诊断与防治指标的监控，已成为生物电工学和生物医学工程学关注的热点和难点问题。目前，国内外还没有公开任何关于利用介电频谱特性鉴别胃癌腺上皮细胞的方法的相关研究报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种无损伤性，准确性高的利用介电频谱特性鉴别胃癌腺上皮细胞的方法，为进一步开发早期胃癌筛查诊断仪器提供了基础。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种利用介电频谱特性鉴别胃癌腺上皮细胞的方法，包括以下步骤：

（1）样本采集

将正常人胃腺上皮细胞样品与胃癌腺上皮细胞样品分别进行体外细胞培养后，经过胰蛋白酶消化、吹打，配制成相应的正常胃腺上皮细胞悬浮液和胃癌腺上皮细胞悬浮液，待阻抗测量；

（2）介电谱测量

将正常胃腺上皮细胞悬浮液和胃癌腺上皮细胞悬浮液分别注入测量池中，将测量池连接到阻抗分析仪上，在0.01～100MHz频率范围取80个频率点，设定每个频率点自动循环扫描测量3次，恒压为200mV，测量每个频率点的细胞样本的电容C和电导G，将各个频率下的电容C和电导G转换成相应频率下的介电常数ε和电导率κ；

（3）建立鉴别依据

通过对正常人胃腺上皮细胞样品与胃癌腺上皮细胞样品的介电常数频谱、电导率频谱、复数平面图、介电损耗因子频谱、电导率虚部频谱和介电损耗角正切频谱的分析，获得正常人胃腺上皮细胞与胃癌腺上皮细胞具有介电行为特征的介电谱特征参数，将正常人胃腺上皮细胞与胃癌腺上皮细胞的介电谱特征参数通过统计学的差异显著性检验分析，获得正常人胃腺上皮细胞与胃癌腺上皮细胞之间具有显著性差异的介电谱特征参数，即得到鉴别用介电谱特征参数，并通过介电常数频谱、电导率频谱、复数平面图、介电损耗因子频谱、电导率虚部频谱和介电损耗角正切频谱，获得正常人胃腺上皮细胞鉴别用介电谱特征参数的数值范围和胃癌腺上皮细胞鉴别用介电谱特征参数的数值范围；

（4）胃癌细胞鉴别

取待测胃细胞进行体外细胞培养后，经过胰蛋白酶消化、吹打，配制成待测胃细胞悬浮液，测量待测胃细胞悬浮液的鉴别用介电谱特征参数值，若其中任一个鉴别用介电谱特征参数值落在相应的胃癌腺上皮细胞鉴别用介电谱特征参数的数值范围内且在正常人胃腺上皮细胞鉴别用介电谱特征参数的数值范围外，即可鉴别该胃细胞为胃癌腺上皮细胞。

步骤（1）中所述的体外细胞培养过程为：将细胞样品置于含10%灭活胎牛血清，100IU/mL青霉素和100IU/mL链霉素的1640培养基中，在37℃，含5％的CO₂的培养箱中生长。