[发明专利]一种植物源杀螨剂的制备与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效、低毒、环保型杀螨的植物提取物，尤其是涉及一种用于杀灭动物螨虫的植物毒素的制备与应用。

背景技术

动物螨病是螨虫寄生动物体表而引起的一种动物慢性体外寄生虫病，其病原为疥螨、痒螨，主要发生于秋末、冬季和初春，通过患病动物与健康动物直接或间接接触传染，广泛传播于牛、羊、马、犬、免、鸡等动物。还可感染人类，在牧区、农牧区和规模化养殖场感染率和发病率均较高。动物发生该病主要表现为食欲降低或废绝、消瘦、被毛脱落等，影响动物的生产性能和经济价值，严重制约畜牧业健康发展和经济效益。目前，用于治疗动物螨病的药物主要为化学合成和抗生素类药物，如伊维菌素、阿维菌素、林丹乳油和螨净等，此类药物在有效防治动物螨病的同时，由于药物残留和草地污染，引起了公共卫生、食品安全和生态环境等问题。从天然产物中寻找、筛选防治动物螨病的药物已成为人们广泛关注的研究热点。

发明内容

本发明为了对外来入侵植物紫茎泽兰的开发利用提供新的思路，从紫茎泽兰叶片中分离纯化一种单体化合物Euptox A，其对家兔等动物的痒螨和疥螨均具有良好杀灭作用，且效果优于临床常用杀螨药物伊维菌素，有潜力作为一种高效、低毒、环保型的杀螨新药。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种用于杀螨的植物提取物，其特殊之处在于：所述植物提取物为紫茎泽兰甲醇提取物。

上述紫茎泽兰甲醇提取物为乙酸乙酯部位提取物。

上述紫茎泽兰提取物的杀螨活性成分为Euptox A。

Euptox A的制备：紫茎泽兰叶粉100 g，甲醇超声提取2-3次，每次60 min，合并滤液；滤液在40℃下减压蒸干得到浸膏；用20%的甲醇溶解浸膏，并用等量乙酸乙酯萃取2-3次，合并乙酸乙酯部分在40℃下减压蒸干得到浸膏；硅胶拌样，干法上样，进行硅胶柱层析，先用二氯甲烷洗脱除去低极性杂质，继续用二氯甲烷：乙酸乙酯（98：2,v/v）洗脱，收集洗脱液，减压蒸干，浸膏溶于甲醇：水：三氯甲烷（85：10：5，v/v/v）溶剂中，上XAD-2大孔树脂柱洗脱，以除去色素等杂质，减压除去洗脱剂，残渣样品进行反复硅胶柱层析得到Euptox A纯品。

Euptox A的杀螨活性试验：用吐温-80等组溶剂溶解，制成含Euptox A为不同浓度的药液。将剂量0.5、1、2、3和4 mg/mL的Euptox A药液加入24孔板中，用滤纸吸取多余液体。用挑虫针将10只螨虫依次挑人各孔中，以吐温-80为空白对照，伊维菌素为阳性对照。每一浓度设5个重复。然后将24孔板放入测试环境(25℃，相对湿度75%)培养，每隔1h用显微镜观察一次，观察4 h，记录每个时段的死亡情况。当虫体肢节长时间不动或用针刺激无反应时判定为死亡。

与现有技术相比，本发明的有益效果如下：

1、高效性：我们试验中发现3、4 mg/mL浓度的Euptox A 在4 h内体外可杀死全部供试疥螨，同样在4 h内4 mg/mL浓度的Euptox A可杀死全部供试痒螨。Euptox A的这种高效性，比现有伊维菌素等大环内酷类抗生素好，目前已有系统研究和临床普遍使用的其它中药及其相关制剂，很少有能达到这种效果的。

2、低毒环保：Euptox A来源于外来入侵植物，家畜对该植物有绝食性，相对还是较安全，且多数天然植物成分在自然环境中可自行降解，不致于在动物产品中长期残留或通过食物链富集。Euptox A作为从这些植物中得到的活性天然成分，同样具有低毒、安全和环保的特点。

3、变废为宝：紫茎泽兰已成为我国外来入侵物种之首，但目前对紫茎泽兰还没有有效的防治措施，且紫茎泽兰生物储量巨大，所需成本昂贵。本发明从紫茎泽兰叶片中分离得到一种具有高效杀螨活性的成分Euptox A，为紫茎泽兰的开发利用提供新的思路和基础，可达到变废为宝的目的。

Euptox A在各种动物的多种螨病的治疗方面展现出广阔的开发利用前景。

具体实施方式

1材料与方法

1.1试验药品及材料

1.1.1供试药材

    紫茎泽兰，2012年7月采集于四川省凉山州，叶子阴干，粉碎备用。

1.1.2供试螨虫