[发明专利]温度敏感型细胞培养装置及制备方法、细胞培养方法

权利要求书

1.一种温度敏感型细胞培养装置，其特征在于，包括聚苯乙烯体，所述聚苯乙烯体上接枝聚苯乙烯-聚N-异丙基丙烯酰胺嵌段聚合物。

2.如权利要求1所述的温度敏感型细胞培养装置的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、制备聚苯乙烯-聚N-异丙基丙烯酰胺嵌段聚合物；

b、将制得的聚苯乙烯-聚N-异丙基丙烯酰胺嵌段聚合物接枝在聚苯乙烯体上，得到温度敏感型细胞培养装置。

3.如权利要求2所述的温度敏感型细胞培养装置的制备方法，其特征在于，所述步骤a进一步包括：在二氧六环中加入聚苯乙烯、异丙基丙烯酰胺单体和偶氮二异丁腈，聚苯乙烯、异丙基丙烯酰胺单体、偶氮二异丁腈的质量之比为1:1:0.01-1:2:0.5，室温下搅拌溶解；通氮气-冷冻-抽排循环3-5次，70-100℃反应10-18h，旋蒸除掉二氧六环，加入四氢呋喃溶解，在乙醚中沉淀，得聚苯乙烯-聚N-异丙基丙烯酰胺嵌段聚合物。

4.如权利要求3所述的温度敏感型细胞培养装置的制备方法，其特征在于，所述聚苯乙烯由以下方法制备：在甲苯中将苯乙烯和二硫化二异丙基黄原酸酯混合搅拌均匀，室温下加入偶氮二异丁腈，苯乙烯、二硫化二异丙基黄原酸酯和偶氮二异丁腈的质量比为（15-20）:3：（1-3），搅拌至偶氮二异丁腈完全溶解，通氮气，70-90℃反应5-7h，旋蒸除掉甲苯，加入四氢呋喃溶解，在石油醚中沉淀，得聚苯乙烯。

5.如权利要求2所述的温度敏感型细胞培养装置的制备方法，其特征在于，所述步骤b进一步包括：将聚苯乙烯体放置到涂层机上，滴加聚苯乙烯-聚N-异丙基丙烯酰胺溶液于聚苯乙烯体上，使涂层机的转速为2000-35000rpm，悬涂30-60s，将制备好的聚苯乙烯体放入烘箱内在80-120℃烘干2-4h，即得到温度敏感型细胞培养装置。

6.如权利要求2所述的温度敏感型细胞培养装置的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤：用傅立叶红外光谱分析或接触角测试的检测方法验证是否接枝成功。

7.一种利用权利要求1所述的温度敏感型细胞培养装置培养细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、对权利要求1所述的温度敏感型细胞培养装置进行消毒、灭菌；

b、用上述的温度敏感型细胞培养装置进行细胞培养，培养温度为35-38℃，待细胞培养结束后，使温度敏感型细胞培养装置的温度降为10-28℃，细胞从温度敏感型细胞培养装置上自动脱落。

8.如权利要求7所述的培养细胞的方法，其特征在于，所述细胞包括单克隆抗体活化的免疫细胞、脐带间充质干细胞、羊膜干细胞、成体组织间充质干细胞和人工诱导的多能干细胞。

9.如权利要求7所述的培养细胞的方法，其特征在于，所述灭菌方法选自用苯扎溴铵溶液浸泡、酒精浸泡、EOG灭菌或γ射线灭菌的其中一种。

10.如权利要求7所述的培养细胞的方法，其特征在于，所述自动脱落的细胞可以成团、成片或者单独分散。