[发明专利]西伯利亚花楸果实提取物在制备抗HeLa癌细胞的药品或保健品中的应用

说明书

技术领域

本发明属于药物的用途领域，具体地涉及西伯利亚花楸果实提取物在制备具有抗HeLa宫颈癌细胞作用的药品或保健品中的应用。

背景技术

癌症是发达国家死亡率最高的疾病，在发展中国家也逐渐成为仅次于心血管疾病的第二大致死疾病。子宫颈癌是全世界妇女中最常见的恶性肿瘤之一，在我国一直高居妇科恶性肿瘤的首位，也是女性癌症死亡率较高之一。天然产物是重要的保健食品资源和药物开发的重要来源，如何将天然产物应用于癌症药物开发和临床治疗方面，是本领域的技术人员不断探索的课题。

西伯利亚花楸为蔷薇科（Rosaceae）花楸，属小乔木，在我国仅分布于布尔津河上游，喜欢生长于云杉和冷杉混交林下，其树形优美、体态端直，叶为大型羽状复叶，极富观赏价值。春季雪白的花朵满树芬芳，秋季成熟的果实鲜红欲滴。

目前西伯利亚花楸果实提取物在抑制HeLa宫颈癌细胞的应用方面还没见报道。

发明内容

本发明是以寻求新型高效的抑制HeLa癌细胞的药品或保健品的开发利用为目的，提出了西伯利亚花楸果实提取物在制备具有抗HeLa癌细胞作用的药品或保健品中的应用。

本发明获得的西伯利亚花楸果实提取物，通过提取物对HeLa癌细胞抑制率的研究表明：西伯利亚花楸果实提取物具有很强的抑制HeLa癌细胞生长的能力，当提取物浓度为200μg/mL，培养72h时，抑制率就达到50%。因此，西伯利亚花楸果实提取物抗HeLa癌细胞能力强，是开发新型高效的天然抗癌药物的一个好选择。

附图说明

图1 是西伯利亚花楸果实提取物对HeLa细胞的抑制作用。

具体实施方式

实施例1

（一）西伯利亚花楸果实提取物的制备：称取西伯利亚花楸果实5 g，用60%的乙醇在60-70℃浸泡1 h，放入超声清洗器中超声30min，连续2次，再用旋转蒸发仪浓缩提取液，经过真空冷冻干燥得西伯利亚花楸果实提取物干粉。

（二）效果实验

1、样品制备

1640完全培养基的配制：胎牛血清放入55℃水浴30min灭活，按体积百分比，取10%的胎牛血清和90%的1640培养液混合均匀，然后加入双抗（青霉素和链霉素按重量比1：1混合），加入量为100u/ml，混合均匀，制成1640完全培养基。

将得到的西伯利亚花楸果实提取物干粉0.01g溶于20%的乙醇溶液1ml，过滤除菌，用1640完全培养基配制成浓度为含有西伯利亚花楸果实提取物1mg/mL的母液，贮存于-4℃冰箱保存。

取含有西伯利亚花楸果实提取物1mg/mL的母液，用1640完全培养基分别配制成浓度为60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL的提取物溶液备用。用于以下效果实验。

2、试验

取对数生长期HeLa细胞（细胞密度约为3×10⁷）接种于96孔板，每孔接种1000个细胞；将其分为以下七组:

对照组：100μL的1640完全培养基；

实验组：备用提取物溶液（60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL）分别加入100μL，每组6个平行孔；

在37℃培养箱中培养，分别于24h，48h，72h后在各孔中加入5mg/mLMTT溶液10μL，继续培养4h后，每孔加入100μLDMSO溶解结晶后，37℃培养箱中过夜；用酶联免疫检测仪测定各孔在490nm处的吸光度，按下式计算细胞抑制率，结果如图1所示。   

 抑制率(%)=(1一A_实验/A_对照)X100%

如图1所示，西伯利亚花楸果实提取物具有很强的抑制HeLa细胞生长的能力，当提取物浓度为100μg/mL，培养72h时，抑制率就达到45%；当提取物浓度为200μg/mL，培养72h时，抑制率就达到50%。因此，西伯利亚花楸果实提取物抗HeLa细胞能力强，是开发新型高效的天然抗HeLa宫颈癌细胞的一个好选择。