[发明专利]直接柱层析得到胡椒碱的方法

说明书

技术领域

本发明属药物制备技术领域，涉及从植物中提取有生物活性的化合物的方法，具体地说是从胡椒科植物胡椒Piper nigrum L.中提取胡椒碱(piperine)。

背景技术：

胡椒（Piper nigrum L.）为胡椒科胡椒属植物，主产于我国海南、云南和越南等热带地区，是食品工业中应用量最大的调味料。胡椒碱是胡椒中主要的活性物质，属于酰胺类生物碱，具有广泛的药理作用如镇静、保肝、抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、抗溃疡、抗抑郁、抗惊厥、提高生物的药物利用率、刺激黑素细胞增殖等（刘屏，索婧侠，于腾飞，中国药物应用与监测，2007, (3): 7-9）。

目前，有关胡椒中胡椒碱的提取方法研究已较为深入和系统。胡椒碱有一定的极性，从天然产物中提取胡椒碱的方法主要有传统的有机溶剂提取法、酸水提取法、超声波辅助有机溶剂提取法、微波辅助有机溶剂提取法、超临界CO₂ 流体萃取法、超声波辅助离子液体提取法等（李萍萍，吕岱竹，吴南村，热带农业科学，2012, 32(7): 75-78；刘文，孙宇章，中国中药杂志，2003, 28(5): 456-457）。现有的各种提取方法均存在操作复杂繁琐、所需时间长、产品回收率低等问题，因此研究能够增加产出率、缩短提取时间、降低成本和提高产品质量的提取工艺仍势在必行。到目前为止，尚未见不经提取过程，直接从胡椒得到胡椒碱的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种直接柱层析得到胡椒碱的方法，从而优化胡椒碱的提取纯化工艺，减少溶剂提取的操作步骤和使用的溶剂种类，降低溶剂用量，并且获得的产品质量稳定、产率高、成本低、耗时时间短，有利于节约能源和环保。

本发明方法以胡椒科植物胡椒的果实为原料，通过研磨或粉碎、与吸附剂研磨混合、直接进行柱层析，石油醚-丙酮洗脱、重结晶得到胡椒碱(piperine)纯品。

本发明方法按如下步骤：

1、取过100目筛的胡椒粉1份重量，80-100目的硅胶或氧化铝0.8～1.2份重量，将二者混合研磨均匀；

2、将上步所得物覆盖在装有80-100目、0.8～5.0份重量硅胶或氧化铝的玻璃层析柱内，以体积比为5:0.5～2.0的石油醚-丙酮或石油醚-乙酸乙酯、氯仿-丙酮、氯仿-乙酸乙酯为流动相进行洗脱，收集馏分;

3、所得含有胡椒碱的馏分减压浓缩后，用体积比为7.8～8.2:2的甲醇-水结晶得胡椒碱淡黄色块状晶体。

使用本发明方法的得率为百分之零点八。

本发明方法的上述工艺参数范围是通过反复试验、分析研究所确定的，为实现发明目的所必须。若超出上述参数范围，会造成不能实现发明目的的后果。

我们采用核磁共振技术和质谱，确定了本发明方法所得活性化合物的结构，结果如下：

所得活性化合物的化学结构为：

为胡椒碱：淡黄色晶体，溶于氯仿，乙醇，丙酮。15%硫酸乙醇显色为黄色。质谱给出分子量285，分子式为C₁₇H₁₉NO₃。

采用核磁共振仪(500 MHz)测定了该化合物的核磁共振氢谱和碳谱，与文献对照完全一致（Wu S, Sun C, Pei S, et al. Journal of Chromatography A, 2004, 1040: 193-204; 吴霞，于志斌，叶蕴华，周亚伟，中草药，2008, 39(2): 179-180）。