[发明专利]血袋渐冻保存装置及其使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种血袋冻存装置，特别涉及一种血袋渐冻保存装置及其使用方法。

背景技术

以冷冻方式保存细胞时，必须经过一段缓慢降温的过程，避免快速降温或不稳定降温导致冷冻过程中细胞内水分因结晶状凝结而产生细胞死亡。成功冷冻细胞需要两个基本条件，一是添加低温保护剂，二是以最佳降温速率降温。常用的低温保护剂为二甲基亚砜（DMSO），DMSO为一种极小的分子，可以通过细胞膜进入细胞内，以减缓细胞内水分形成冰晶的大小与速率，保护细胞在冷冻储存和解冻过程中不受破坏，增加细胞存活率。但DMSO浓度高时亦具有细胞毒性，故冻存时需控制在10%（wt）以下，合并最佳降温速率以达到细胞的最佳冷冻保存。

一般市售的细胞渐冻保存盒(Cryo box)为能达到最佳的降温速率，会在内盒置物层与外壳中间填充100%异丙醇(isopropyl alcohol)作为渐冻剂，可以每分钟下降1℃的温度来稳定降温，最低可达到-80℃，并可长时间维持低温。异丙醇在冷冻细胞的过程中可以辅助实现缓慢降温，利用该物质可以使降温速率达到近似于-1℃/分钟，在冷冻仪中也可获得平滑降温曲线的作用。但是，异丙醇具有高度挥发性，并且容易吸收空气中的水分，所以经过长时间的使用后，其浓度会逐渐下降而影响其控温性能。因此，科罗耐(Kelowna)国际科技有限公司所出品的冻管渐冻盒，不需添加异丙醇来达到渐冻效果，且由于可快速回温，故能够缩短再次使用的时间。但是目前为止，已知的市售渐冻盒(如Nalgene出品的Mr. Frosty)仅供冻管冻存，并无可供血袋冻存的血袋渐冻盒等相关产品的公开使用。

美国细胞治疗认证协会(FACT)规范指出，脐带血须储存于抗冻血袋中保存，因为抗冻血袋的密闭性高，能降低污染机会。目前一般业界所采用的保存方法是，将收集得到的脐带血装入例如Pall公司（美国）生产的冷冻袋(cryo preserved bag)内。Pall冷冻袋是一种新式的血袋，包括二个具有分隔的部分，其中一部分容量是20毫升，另一部分则为5毫升。后者可在干细胞移植前用于自我扩增，然后与前者一同移植给病人，或者用于治疗受损的组织器官。为了防止交叉污染，在冷冻袋外面会另加一层袋子后装入一个铝合金盒，然后将此金属盒放入可控速率降温仪(computerised temperature-reducing system)进行程序冷冻，降温速率为-1℃/分钟。当温度降到-80℃时，脐带血将被转入液氮箱内，在气态内（保持≤-190℃低温）长期保存(超过一年)。但可控速率降温仪费用昂贵，除使干细胞储存及移植成本大增外，每分钟下降1℃是冻管中小量冻存细胞时的标准值，对于血袋中大量储存细胞时虽可作为一参考值，但最佳降温速率因细胞数量而有微调整，因此细胞于血袋中解冻后存活率低于冻管中解冻后存活率，目前世界各国法规规定血袋解冻后细胞存活率如达70%以上为临床使用的放行标准之一。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种血袋渐冻保存装置及其使用方法。

为达到上述目的，本发明提供一种血袋渐冻保存装置，包括：

一主体外壳，其设有一能供开启、密闭的上盖，并于所述血袋渐冻保存装置组装完成后呈现密封；

一层以上的血袋置入空间，所述血袋置入空间容置有欲冻存的血袋；以及

二个以上的铁氟龙渐冻袋，所述铁氟龙渐冻袋与欲冻存的血袋接触，且所述铁氟龙渐冻袋中填充有能使降温速率达到-1℃/分钟的渐冻剂。

作为上述一种血袋渐冻保存装置的优选方案，其中所述渐冻剂为异丙醇。渐冻袋大小以配合该主体内缘的长宽为原则，其中所填充的渐冻剂重量(g)/渐冻袋面积(cm²) 比例为0.7~0.9，此考虑到所使用的渐冻袋的较佳承载量。

作为上述一种血袋渐冻保存装置的优选方案，其中所述血袋置入空间与所述铁氟龙渐冻袋以交互堆栈方式，由下至上排列于所述血袋渐冻保存装置的主体内部。

作为上述一种血袋渐冻保存装置的优选方案，其中所述血袋置入空间的上、下层皆与所述铁氟龙渐冻袋连接，且置入的血袋的上、下面都能分别接触到所述铁氟龙渐冻袋。

作为上述一种血袋渐冻保存装置的优选方案，其中所述主体外壳的上盖以压合的方式与所述血袋渐冻保存装置的主体密合，以避免内容物污染及方便运送与堆栈。

作为上述一种血袋渐冻保存装置的优选方案，其中所述上盖的内面周缘设有与所述主体外壳的开口周缘密合的环状沟槽。