[发明专利]一种腺萼马银花组织培养快速繁殖方法

权利要求书

1.一种腺萼马银花组织培养快速繁殖方法，其特征在于该方法按如下步骤进行：

1）外植体的选择：春季从已开花腺萼马银花母株上剪取带有潜伏芽的新发枝条；

2）外植体灭菌：剪去枝条叶片，先用自来水浸泡并冲洗10-20分钟，用洗洁精洗涤1-2次后吸干；然后，在无菌室超净台上用75%酒精消毒15-30秒，用无菌水冲洗3-5遍，再用0.1％氯化汞消毒8-12分钟，最后用无菌水冲洗3-5遍后吸干；

3）腋芽诱导培养：将灭好菌的枝条切除茎尖，余下的枝条剪成2-3cm长的茎段，每段带有1-2个腋芽，斜插入诱导培养基中；于23-26℃光16小时，黑8小时，培养3-5周后，茎段潜伏芽发育生长出新枝条至2-4cm长；所述的诱导培养基由以下的组分构成：WPM或Anderson基本培养基 + ZT 1.0-2.0 mg/L + NAA0.05-0.1 mg/L + 20 g/L 蔗糖或白糖 + 6-10 g/L 琼脂，pH4.8-5.2，高温灭菌；

4）增殖培养：剪取新长出的枝条，去顶芽后插入增殖培养基中，于23-26℃光16小时，黑8小时，培养6-8周后，茎段长出丛生芽；此阶段可重复进行；所述的增殖培养基由以下的组分构成： WPM或Anderson基本培养基 + ZT 1.0-2.0 mg/L + NAA 0.05-0.1mg/L + 20g/L 蔗糖或白糖 + 6-10 g/L 琼脂，pH 4.8-5.2，高温灭菌；

5）壮苗培养：将长到1-2cm长的丛生芽剪切移入壮苗培养基中，于23-26℃光16小时，黑8小时，培养2-4周，待长到3-5cm后移入基质中，进行瓶外生根；所述的壮苗培养基由以下的组分构成：WPM或Anderson基本培养基+ ZT 0.5-1.0 mg/L + NAA0.05-0.1 mg/L + 20g/L 蔗糖或白糖 + 6-10 g/L 琼脂，pH 4.8-5.2，高温灭菌；

6）瓶外生根：在每年10至次年3月，将长到3-5 cm高的瓶苗在室外放置1周，洗去枝条上的琼脂后移入含有含泥炭：珍珠岩：蛭石体积比2：1：1的基质中，在保湿保温条件下生长，1-2个月后生根。