[发明专利]一组用于诊断斑疹伤寒的蛋白及其应用

权利要求书

1.一组用于诊断斑疹伤寒的蛋白，由如下（1）-（4）种抗原蛋白组成：

（1）Sca5蛋白

Sca5的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；

（2）FtsZ蛋白

FtsZ的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；

（3）GroEL蛋白

GroEL的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示；

（4）Rp828蛋白

Rp828的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。

2.权利要求1所述蛋白的编码基因。

3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于：所述编码基因为如下中至少一种：

（1）Sca5编码基因

1）SEQ ID No.5所示的DNA分子；

2）在严格条件下与1）限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述Sca5蛋白的DNA分子；

3）与1）或2）限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1所述Sca5蛋白的DNA分子；

（2）FtsZ编码基因

1）SEQ ID No.6所示的DNA分子；

2）在严格条件下与1）限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述FtsZ蛋白的DNA分子；

3）与1）或2）限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1所述FtsZ蛋白的DNA分子；

（3）GroEL编码基因

1）SEQ ID No.7所示的DNA分子；

2）在严格条件下与1）限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述GroEL蛋白的DNA分子；

3）与1）或2）限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1所述GroEL蛋白的DNA分子；

（4）Rp828编码基因

1）SEQ ID No.8所示的DNA分子；

2）在严格条件下与1）限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述Rp828蛋白的DNA分子；

3）与1）或2）限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1所述Rp828蛋白的DNA分子。

4.含有权利要求2或3所述蛋白编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。

5.一种用于诊断斑疹伤寒的蛋白芯片，包括基底和设于基底之上的若干个检测点；每个检测点上设有一种蛋白，所述若干个检测点上共设有如下四种蛋白：权利要求1中所述Sca5蛋白、权利要求1中所述FtsZ蛋白、权利要求1中所述GroEL蛋白和权利要求1中所述Rp828蛋白。

6.根据权利要求5所述的蛋白芯片，其特征在于：每个检测点的蛋白含量为11ng。

7.一种诊断斑疹伤寒的试剂盒，由权利要求5或6所述的蛋白芯片、Cy5标记的能与待测血清相结合的抗体、封闭液和漂洗液组成；

所述的封闭液是将牛血清白蛋白与PBS缓冲液按照1g：100ml的配比混合得到的；

所述漂洗液为PBST缓冲液。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还包括说明书，所述说明书中记载如下内容：

使用方法：将待测样本的血清与转入空载体pET-32a(+)的BL21(DE3)的细胞裂解液在25℃共孵育2h，离心取上清液，得到中和后血清；将中和后血清加入到所述蛋白芯片上，25℃作用1h；再加入Cy5标记的能与待测血清相结合的抗体，25℃作用1h；检测每个蛋白检测点的荧光信号值；

结果判断方法：以样本荧光平均值减去背景荧光平均值作为每个蛋白检测点的反应荧光值，每种蛋白所有重复点的反应荧光值的平均值作为该种蛋白的荧光信号值；以未感染任何病菌的正常血清作为对照，若一种蛋白的荧光信号值大于对照的荧光信号平均值与2倍SD之和，则认为该种蛋白的结果为阳性；若四种蛋白中3个以上显示阳性时，则判定所述待测样本候选为斑疹伤寒病样本。

9.权利要求1所述的4种蛋白、权利要求5或6所述的蛋白芯片、权利要求7或8所述的试剂盒在制备诊断斑疹伤寒的产品中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述斑疹伤寒由病原菌普氏立克次体（Rickettsia prowazekii）或莫氏立克次体（Rickettsia typhi）感染引起的。