[发明专利]磺胺类药物残留检测试纸条及使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种磺胺类药物残留检测试纸条及使用方法。

 

背景技术

自1932年首次合成含有磺胺基团的红色偶氮染料百浪多息以来，其发展已经经历了80多年的历史，磺胺类药物（sulfaonamides）以其抗菌谱较广、性质稳定、价格低廉、不消耗粮食、国内可大量生产等优点，至今认为畜禽类抗感染治疗的重要药物之一。作为饲料添加剂，养殖业使用标有停药期的动物用药品及含有含药饲料添加剂后，如果不遵守适当的休药期，其肌肉组织、蛋和奶中就会被残留的磺胺类药物污染。短期大剂量或长期小剂量给药，很容易造成磺胺类药物在动物各组织中蓄积。当饲料或饮水被磺胺类药物污染后，也可导致动物性食品中磺胺类药物残留量严重超标。磺胺类药物残留问题的出现已有近30年时间，并且在近15－20年内磺胺类药物残留超标现象比其他任何兽药残留都要严重。很多研究表面猪肉及其制品中磺胺类药物超标现象是有发生，其残留主要发生在猪肉中，其次是小牛肉和禽肉中的残留，特别是致癌行的磺胺二甲基嘧啶残留给人类健康带来了威胁。研究显示目前养殖中磺胺类抗生素滥用现象非常严重，导致磺胺类药物在动物性食品乃至饮用水中重度富集，使用这些食品和饮用这样的水源，对人类可产生各种毒性作用，甚至造成器质性损伤，也可引发过敏反应，更甚者导致癌症的发生。

由于人们对动物源性食品中磺胺类药物残留的日益关注，已有大量技术用于磺胺类药物残留水平的检测，这些技术包括微生物法、免疫分析法、薄层色谱法(TLC)、气相色谱(GC)、气相色谱－质谱联用法(GC-MS)、毛细管电泳法(CE)、高效液相色谱法(HPLC)及生物传感器等。HPLC法检测灵敏度和特异性都较高，但是其操作比较繁琐。理化检测方法程序复杂，分析费用高，不适宜大量样品的检测，微生物法耗时长，灵敏度不高。

目前，胶体金免疫层析法是磺胺类兽药残留分析中最为常用的一种方法，但由于检测标记物胶体金分子的光学特性的局限，该方法只能实现对磺胺类药物的定性检测，很难实现对其残留的定性测量，而且现有技术中由于检测样品的千差万别，其中的pH值、离子浓度和蛋白含量不同，这必然对结合垫指示物质的释放造成不同的影响，加之硝酸纤维素膜等层析试纸条组成结构不均一性，会导致溶液的层析和免疫反应产生差异，相同的层析试纸条中不同批次可能出现较大的不均一性，即批间差CV。

量子点(Quantum Dots,QDs)是一种半导体纳米晶体，具有激发波长范围很宽,可以涵盖整个光谱，从紫外到远红外区，同一波长的光可激发不同大小的量子点，发射光光谱峰狭窄而对称，无有机荧光的红托尾现象，发射光谱可调，发射光强，是有机荧光染料的1000倍，以及稳定性好，可经受反复多次激发,不易淬灭优良的光谱特征和光学稳定性，与生物荧光染料相比具有宽的激发谱线范围、窄的发射谱线、发光效率高、发光颜色可调、光稳定性好等一系列优点，适于作为荧光标记物。

针对上述问题，本发明选择量子点作为对标记物分子并对改进层析系统，获得可定量检测且批间差异小的磺胺类药物层析试纸条检测体系。

 

发明内容

 

本发明所要解决的技术问题是提供一种检测磺胺类药物残留的免疫层析试纸条，其改进标记物分子，以实现对药物残留的定量检测；同时改进层析系统，以获得批间差异小的磺胺类药物免疫层析试纸条检测体系。

为解决上述技术问题，本发明提供一种检测磺胺类药物残留的免疫层析试纸条，其特征在于所述试纸条的基板上设置有样品施加区、反应捕获区和剩余液体吸收区，并且所述样品施加区中固定有量子点标记的磺胺类药物特异性单克隆抗体，反应捕获区中设置含有磺胺类药物多克隆抗体的检测条带和含有兔抗鼠IgG抗体的质控条带；

其中，所述样品施加区、反应捕获区和剩余液体吸收区位于试纸条基板向下凹设的微流道上；

其中，所述微流道底部浇铸有硝化纤维溶液，形成硝化纤维层；

其中，所述微流道上样品施加区、反应捕获区和剩余液体吸收区的直径约不大于2mm；

其中，所述基板的材质为聚碳酸酯，其上的微流道通过蚀刻工艺获得；

其中，所述反应捕获区中硝化纤维层的厚度不低于样品施加区和剩余液体吸收区；

其中，所述量子点标记物为CdTe；