[发明专利]一种含有角质细胞生长因子KGF2的植物油体有效
申请号: | 201310333809.1 | 申请日: | 2013-08-04 |
公开(公告)号: | CN103468737A | 公开(公告)日: | 2013-12-25 |
发明(设计)人: | 姜潮;李校堃;李海燕;田海山;杨晶;王兰;陈玉斌;金立波 | 申请(专利权)人: | 吉林农业大学;吉林农大生物反应器工程有限公司 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/66;C11B1/04 |
代理公司: | 长春市东师专利事务所 22202 | 代理人: | 张铁生 |
地址: | 130118 吉林省*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 含有 角质 细胞 生长因子 kgf2 植物油 | ||
1.一种表达载体质粒pOBT- KGF2,它是由下述方法制备的:
1)以p1301为基本骨架,将其T-DNA区进行改造,除了保留有T-DNA区的NOS基因外其余基因均被35S和Bar基因替换,以pEGAD质粒为模板,利用35S-F上游引物CGGGGTACCATCCGTCAACATGGTGGAGCACGACACGCTTGTCTACT和Bar-R下游引物CGGAATTCACTAGTTCAGATCTCGGTGACGGGCAGGACCGGACGGGGCGGAACC进行PCR,扩增得到35S-Bar基因,利用kpnI和SpeI酶切位点将其插入到pCAMBIA1301载体T-DNA区的NOS基因前,构建了p1301-35S-Bar-NOS基本质粒,简写为pO质粒;
2)用pstI和NcoI分别酶切并连接pO质粒和序列表SEQ ID NO.2所示基因,得中间载体pOB;
3)用HindⅢ和kpnI分别酶切并连接中间载体pOB和序列表SEQ ID NO.3所示基因,得植物特异表达载体pOBT;
4)用NcoI与HindⅢ分别酶切并连接植物特异表达载体pOBT和序列表SEQ ID NO.5所示基因,得表达载体质粒pOBT- KGF2。
2.一种含有角质细胞生长因子KGF2的植物油体,它是将其碱基序列如序列表SEQ ID NO.5所示的基因插入植物特异表达载体中,获得的表达载体质粒,转化至油料作物中,收获种子提取油体。
3.根据权利要求2所述的一种含有角质细胞生长因子KGF2的植物油体,其特征在于:所述的植物表达载体为权利要求1所述的植物特异表达载体pOBT。
4.根据权利要求2或3所述的一种含有角质细胞生长因子KGF2的植物油体,其特征在于:所述的油料作物为红花、油菜、大豆或花生。
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