[发明专利]拟南芥海藻糖酶基因片段及其应用

权利要求书

1.如下A）或B）的DNA分子：

A）序列表序列1中第214位至第703位核苷酸序列所示的DNA分子；

B）在严格条件下与A）限定的序列杂交的DNA分子。

2.如下C）或D）的DNA分子：

C）式I所示的DNA片段，（I）SEQ_正向-X-SEQ_反向；

所述SEQ_正向是序列表序列1中包括第214位至第703位的核苷酸段；

所述SEQ_反向的序列与所述SEQ_正向的序列反向互补；

所述X是所述SEQ_正向与所述SEQ_反向之间的间隔序列，在序列上，所述X与所述SEQ_正向及所述SEQ_反向均不互补；

D）与C）限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同一性且降低海藻糖酶编码基因表达的DNA分子。

3.根据权利要求2所述的DNA分子，其特征在于：所述SEQ_正向的核苷酸序列是序列表序列1中第214位至第703位核苷酸序列。

4.含有权利要求1-3中任一所述DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌或重组病毒；

所述重组载体具体可为重组载体pGSA1285∷RNAi-TRE；所述重组载体pGSA1285∷RNAi-TRE是将序列表序列1中第214位至第703位核苷酸所示DNA沿着从Xho I至Sac I的方向插在载体pGSA1285的Xho I和Sac I位点间，得到的重组载体记作中间载体；再将序列表序列1中第214位至第703位的反向互补序列所示的DNA沿着从BamH I至Spe I的方向插在所述中间重组载体的BamH I至Spe I位点间得到的的重组载体。

5.权利要求1-3中任一所述DNA分子抑制或下调目的植物海藻糖酶编码基因表达或提高目的植物耐逆性中的应用；所述耐逆性具体可为耐旱性和/或耐盐性。

6.一种培育耐逆转基因植物的方法，是降低目的植物中海藻糖酶编码基因的表达，得到耐逆性高于所述目的植物的转基因植物；所述耐逆性具体可为耐旱性和/或耐盐性。

7.根据权利要求6所述的方法，所述降低目的植物中海藻糖酶编码基因的表达是通过将权利要求2或3所示的DNA分子导入目的植物中实现的。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于：所述降低目的植物中海藻糖酶编码基因的表达是通过所述重组载体pGSA1285∷RNAi-TRE实现的。

9.根据权利要求5-8中任一所述的应用或方法，其特征在于：所述目的植物为单子叶植物或双子叶植物，所述双子叶植物具体可为烟草。

10.根据权利要求5-9中任一所述的应用或方法，其特征在于：

所述海藻糖酶为如下a）或b）的蛋白质：

a）由序列表中序列4所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

b）将序列表中序列4的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物的耐逆性相关或具有海藻糖酶功能的由（a）衍生的蛋白质；

和/或，所述海藻糖酶基因为如下c）或d）或e）的基因：

c）其核苷酸序列是序列表中序列1所示的DNA分子；

d）与c）限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码a）或b）所述蛋白质的DNA分子；

e）在严格条件下与c）或d）限定的DNA序列杂交且编码a）或b）所述蛋白质的DNA分子。