[发明专利]一株桃色顶孢霉JX524288及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物领域，涉及一株桃色顶孢霉JX524288及其应用，特别涉及一株能够广谱拮抗病原真菌以及促进大豆萌发的桃色顶孢霉JX524288及其应用。

背景技术

植物病害是严重危害农业生产的自然灾害之一，据联合国粮农组织估计，世界上每年因病害造成的粮食减产在10%以上。使用化学杀菌剂可以有效控制植物病害的为害，但化学杀菌剂存在污染环境、破坏生态平衡、药物残留等问题,尤其是20世纪50年代以来，全球环境遭到空前破坏和污染，1992年联合国环境与发展大会通过了《21世纪议程》，确立了可持续发展在全球经济和社会中的战略地位，因此，植物病害的生物防治越来越受到重视。

生物防治的科学记载是从sanfprd(1926)报道土壤中某些拮抗性微生物对于土传病原菌的抑制性开始的。我国植物生防的研究工作开始于50年代初期，70年代以来，病害生物防治的研究和实践十分活跃，而且发展迅速。近几年来，国内外有关生物防治的文献资料急剧增加，生物防治的生产实践也在扩大。

生物防治微生物从腐生的土壤微生物到植物体微生态系中微生物的利用；防治病害的种类从种传和土传病害到地上部的气传和虫传病害。由于生物防治具有对环境、生态和人类健康较为安全的优点，因此，世界各国十分的重视生防微生物的开发与研究。

目前的研究已发现许多微生物具有生防功能，在生产上广泛应用的真菌有木霉、毛壳菌、酵母菌、淡紫拟青霉、厚壁孢子轮枝菌及菌根真菌等。李莉报导了顶孢霉对菜青虫的生长抑制作用，宋丽雯报导了顶孢霉对蚜虫的抑制作用，但顶孢霉在抑制植物病原真菌中还未见报道。

发明内容

本发明的第一目的是提供一株桃色顶孢霉JX524288，具有广谱的拮抗病原真菌效果的同时，其代谢物对大豆种子萌发具有一定的促进作用，为植物病害生物防治提供新的微生物资源。

本发明的第二目的是提供上述桃色顶孢霉JX524288的用途。

本发明通过以下技术方案来实现：

一、一株桃色顶孢霉（Acremonium persicinum）JX524288，其保藏编号为CCTCC NO:M2013200。

该微生物的无性阶段属于半知菌门Deuteromycota，丝孢纲Hyphomycetes，丛梗孢目Moniliales，淡色菌科Moliliaceae。

在大庆选校园内山坡上，用铁锹挖取土壤深度约为4-10cm的土样，装入取样纸袋中，将纸袋标记好并带回实验室进行土壤内真菌的分离得到。本发明桃色顶孢霉在固体查氏培养基平板中的菌落菌丝为绒毡状，菌落表面为淡粉色，显微观察显示，该菌株的产孢结构为瓶梗，瓶梗底部膨大，互生，孢子着生在瓶梗顶端。

本发明桃色顶孢霉真菌菌株的系统发育学鉴定。通过真菌通用引物ITS4和ITS5利用PCR扩增出546bp的rRNA基因，将此序列通过BLAST程序与GenBank中收集的核苷酸序列对比，结果表明，相似性在99%以上的有30个菌株核苷酸序列，主要是顶孢霉菌（Acremonium）、子囊菌（Ascomycota）、虫草菌（Cordyceps），菌株Acremonium persicinum FN706545与拮抗真菌的序列非常相似，长度相差1个碱基。比对鉴定的结果表明，这一菌株为桃色顶孢霉（Acremonium persicinum）。

本发明菌株的序列与GenBank中与其相似的20个菌株的序列用clustalx软件进行比较，再用MEGA4程序中Neighbor Joining方法建立系统发育树，发现，拮抗真菌与Acremonium persicinum FN706545的亲缘关系最近，达99%，验证了该菌株为桃色顶孢霉（Acremonium persicinum）。

该真菌菌株的培养条件为：在PDA培养基上，其菌丝及孢子的生长状态最佳，气生菌丝生长发达，产孢量较多。以查氏培养基为基础培养基，菌丝生长的最适碳源为蔗糖、氮源为胰蛋白胨；在pH8.5、温度为30℃时可提高菌丝生长速率，添加无机离子Zn²⁺对菌丝生长有利。

二、上述的桃色顶孢霉（Acremonium persicinum）JX524288在拮抗病原真菌以及促进大豆萌发上的应用。