[发明专利]一种生产多酶系的地衣芽孢杆菌及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物工程中酶工程发酵技术领域，具体地，涉及一种生产多酶系的地衣芽孢杆菌。

背景技术

酯酶能水解酯类产生相应的酸和醇，也可以完成酯化、转酯、酯交换等反应，合成食品工业中很多重要的香味物质。在酒类、食醋、酱油和其他酿制食品的酿造中均可以利用酯酶催化产生的酯类来增进香味。我国是世界上重要的白酒生产大国，目前在利用红曲霉、根霉和球拟酵母等产生的酯酶，来增加白酒中的己酸乙酯、乙酸乙酯、乳酸乙酯、丁酸乙酯等4大类酯的含量，提高白酒优级率均取得较好进展，但对产酯酶细菌的筛选和应用的研究还鲜有报到。而且在大曲酒发酵过程中酒醅的酸度逐渐增大从而抑制了产酶微生物的正常代谢，造成酒醅中的淀粉和蛋白质残存较高。因此筛选在酸性条件下能正常生长同时能产生酸性酶系的微生物对提高酒醅原料中淀粉和蛋白质的利用率，增加酒的产出率，具有重要实际意义。

发明内容

本发明提供了一种生产多酶系的地衣芽孢杆菌，应用该地衣芽孢杆菌能够在酸性环境下正常生长，且能够合成酯类物质，分解淀粉及蛋白质类物质。

    本发明提供一种生产多酶系的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis），将其于2013年4月18日送至位于北京市朝阳区北辰西路1号院的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）进行保藏，保藏编号为CGMCC NO.7484。

    进一步地，所述生产多酶系是所述地衣芽孢杆菌在同一培养条件下能同时产生酯酶，酸性蛋白酶和酸性淀粉酶。

    本发明所述地衣芽孢杆菌CGMCC NO.7484的酯酶酶活为11.5 U/ml。

    本发明所述地衣芽孢杆菌CGMCC NO.7484的酸性蛋白酶酶活为768 U/ml。

    本发明所述地衣芽孢杆菌CGMCC NO.7484的酸性淀粉酶酶活为11.995 U/ml。

    进一步地，所述培养条件为在酸性环境下培养。

    本发明的第二个目的是提供一种生产多酶系的地衣芽孢杆菌的筛选方法，是高温大曲在以三丁酸甘油酯为诱导底物、pH 5.0-6.0的平板上培养筛选获得；优选地，所述pH为 6.0，所述生产多酶系是所述地衣芽孢杆菌在同一培养条件下能同时产生酯酶，酸性蛋白酶和酸性淀粉酶。pH 5.0-6.0时，均能筛选得到产生酯酶、酸性蛋白酶和酸性淀粉酶的地衣芽孢杆菌，在pH为6.0时筛选得到的地衣芽孢杆菌产生酯酶、酸性蛋白酶和酸性淀粉酶的量最多。

本发明的第三个目的是提供上述地衣芽孢杆菌的扩大培养方法，是用培养基在pH为5.0-6.0的条件下培养的，优选地，所述pH为 6.0。pH为5.0-6.0之间时，均能完成对本发明的地衣芽孢杆菌的扩大培养，当pH为6.0时，扩大培养的效果最好。

    本发明的第四个目的是提供上述地衣芽孢杆菌在产生酯酶，酸性蛋白酶和酸性淀粉酶中的应用；优选地，所述应用是用培养基在pH为5.0-6.0的条件下培养所述地衣芽孢杆菌，优选地，所述pH为 6.0。

    本发明的第五个目的是提供上述地衣芽孢杆菌在酯的合成和蛋白质水解制肽中的应用。

本发明筛选到的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）CGMCC NO.7484，能在酸性环境下培养产生酯酶、蛋白酶和淀粉酶，应用产生的酯酶可以制备增香酯类如：己酸乙酯、乙酸乙酯、乳酸乙酯等，同时可以应用蛋白酶制备蛋白水解肽。可以作为大曲酒发酵过程中所使用的产酶微生物的备选。

附图说明

图1 为本发明的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）菌株的革兰氏染色照片；

图2 为本发明的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）菌株的芽孢染色照片；

图3 为本发明的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）菌株的酯酶筛选平板照片；

图4 为本发明的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）菌株的酸性淀粉酶筛选照片；

图5为本发明的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）菌株的酸性蛋白酶筛选照片。

具体实施方式

以下通过实施例来进一步阐明本发明，下列实施例用于说明目的而非用于限制本发明范围。