[发明专利]一种测定烟草中非挥发性有机酸的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及烟草成分的提取测定应用技术领域，特别提供了一种测定烟草中非挥发性有机酸的方法。

背景技术：

现有技术中，非挥发性有机酸是影响烟草感官品质的主要化学成分之一，特别是苹果酸、油酸、亚油酸和丙二酸，不仅在烟叶中的含量较高，而且对烤烟的香气质和香气量有很大影响。它可调节烟草pH值，使吃味改进，而烟叶pH值表达了烟叶有机和无机组分的酸碱平衡状态，能够反映烟气强度(含氮碱类)和刺激性，也可间接反映烟气的芳香性。目前烟草中非挥发性有机酸含量的测定方法各式各样，测定结果也有所不同，各自有其优缺点，探寻快速测定烟草中非挥发性有机酸含量的方法，可为提高卷烟品质提供数据支撑，因此对烟草中非挥发性有机酸的具体测定方法进行研究具有重要的价值。

20世纪90年代以来，超高压(Ultra High Pressure,UHP)技术指将物料放入液体介质中，在100～1000MPa压力下作用一段时间后，物料发生许多不可逆的生化反应，根据Le chatelier原理，高压可使的物料体积减小而加快反应速度，利用超高压可实现有机酸的快速、准确分析。目前，未见在超高压条件下进行烟草有机酸测定的相关报道。

因此，人们期望获得一种技术效果优良的测定烟草中非挥发性有机酸的方法。

发明内容：

本发明的目的是提供一种技术效果优良的测定烟草中非挥发性有机酸的方法。

一种测定烟草中非挥发性有机酸的方法，主要涉及的非挥发性有机酸具体为下述几种之一或其组合：草酸、丙二酸、丁二酸、月桂酸、正十三碳酸、苹果酸、正十五碳酸、棕榈酸、柠檬酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸；所述的烟草具体包括下述几种之一或其组合：白肋烟叶、烤烟烟叶、香料烟叶、烟梗、薄片、膨胀烟丝、混合型卷烟烟丝和烤烟型卷烟烟丝；其特征在于：所述测定烟草中非挥发性有机酸的方法具体要求依次如下：

首先提取烟草样品获得对应的处理液，提取过程如下：将烟草样品（因后面有比例，所以这里不需要体积质量）粉碎后置于食品级双层复合袋（这里并不需要限制内容，通常在论文中也是这样写的）中，加入浓度为10-15%的硫酸-甲醇溶液，每1.0000g烟草样品加入硫酸-甲醇溶液25-50mL；每1.0000g烟草样品再加入浓度2.0mg/mL的己二酸内标溶液1mL；然后对双层复合袋经过热封口后置于超高压处理腔内，经600-900MPa压力处理以便完成非挥发性有机酸的甲酯化，处理时间为10-15min获得烟草样品的超高压处理液；

然后取超高压处理液10mL于125mL分液漏斗中，加入20-30mL饱和NaCl溶液，每次用10mL二氯甲烷萃取，萃取6次合并萃取液，加入3.5g无水硫酸钠干燥过夜；

之后对萃取液采用气相色谱进行测定，取测得的最大值，以便确认烟草中非挥发性有机酸的含量。

所述测定烟草中非挥发性有机酸的方法优选具体要求依次如下：

首先提取烟草样品获得对应的处理液，提取过程如下：将烟草样品（因后面有比例，所以这里不需要体积质量）粉碎后置于食品级双层复合袋（这里并不需要限制内容，通常在论文中也是这样写的）中，加入浓度为10%的硫酸-甲醇溶液，每1.0000g烟草样品加入硫酸-甲醇溶液25-50mL；每1.0000g烟草样品再加入浓度2.0mg/mL的己二酸内标溶液1mL；样品与硫酸-甲醇溶液的质量体积比为1：30；然后对双层复合袋经过热封口后置于超高压处理腔内，经700MPa压力处理以便完成非挥发性有机酸的甲酯化，处理时间为12min获得烟草样品的超高压处理液；

然后取超高压处理液12mL于125mL分液漏斗中，加入20-30mL饱和NaCl溶液，每次用10mL二氯甲烷萃取，萃取6次合并萃取液，加入3.5g无水硫酸钠干燥过夜；

之后对萃取液采用气相色谱进行测定，取测得的最大值，以便确认烟草中非挥发性有机酸的含量。

本发明给出了烟草中非挥发性有机酸的测定方法，并对其中的试验条件进行了深入的研究，以期最大程度的提取出烟草样品中的非挥发酸，接近烟草中非挥发性有机酸真实值。样品的处理工艺中主要是考虑以下四个因素：硫酸-甲醇溶液的浓度、硫酸-甲醇溶液的用量、超高压压力、处理时间。