[发明专利]高致病性猪繁殖与呼吸综合症特异性转移因子的制备方法

权利要求书

1.一种高致病性猪繁殖与呼吸综合症特异性转移因子的制备方法，其特征在于其包括下述步骤：

（1）无菌采取经过高致病性猪繁殖与呼吸综合症病毒抗原免疫猪的脾脏，去除脾脏的被膜和结缔组织，用生理盐水冲洗，称重，剪碎；

（2）按照其重量加入1.5～3倍的无菌生理盐水，用高速组织捣碎机2500 r/min绞碎，制成匀浆；

（3）匀浆-20℃冷冻和室温融化，反复冻融8次后，于4 ℃下4000 r/min离心15 min，收取上清液；

（4）将上清液置于透析袋内，用无热源的等体积无菌生理盐水在0～4 ℃环境下透析36～48h，收集透析外液，用直径为0.22μm的滤膜过滤除菌，加入冷冻保护剂，混匀，即得到高致病性猪繁殖与呼吸综合症特异性转移因子溶液，分装，-20 ℃保存。

2.根据权利要求１所述的高致病性猪繁殖与呼吸综合症特异性转移因子的制备方法，其特征在于步骤（1）中抗原免疫过程为：将高致病性猪繁殖与呼吸综合症活毒疫苗用生理盐水稀释后，肌肉注射给2头3月龄健康猪，间隔2周免疫一次，首次注射2头份 /头，第2～4次免疫4头份/头；第四次免疫10天后，前腔静脉采血，分离血清，经ELISA检测抗PRRSV抗体水平为阳性即合格。

3.根据权利要求2所述的高致病性猪繁殖与呼吸综合症特异性转移因子的制备方法，其特征在于所述高致病性猪繁殖与呼吸综合症活毒疫苗为JXA1-R毒株。

4.根据权利要求１所述的高致病性猪繁殖与呼吸综合症特异性转移因子的制备方法，其特征在于步骤（4）中透析袋孔径为7.0kD。

5.根据权利要求１所述的高致病性猪繁殖与呼吸综合症特异性转移因子的制备方法，其特征在于步骤（4）中采用蔗糖作为冷冻保护剂，特异性转移因子溶液中蔗糖的质量浓度为3.4%。