[发明专利]一种提取瑞诺木素的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药化学技术领域，涉及一种一种提取瑞诺木素的方法。

背景技术

瑞诺木素（Reynosin ），mp.145-146℃，分子式为C₁₅H₂₀O₃，分子量为248.32，结构式为：

瑞诺木素是从菊科(Compositae)奇蒿 Artemisia anomala S.Moore的地上部分分离得到一种倍半萜内酯类化合物。药理研究表明，瑞诺木素对对人型小细胞肺癌株和人型结肠癌细胞株的IC50分别为10.7μM和8.9μM(对照品Cisplatin为1.0μM和3.0μM)。

现有技术中，尚未见工业化制备瑞诺木素的生产工艺报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种提取瑞诺木素的方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种提取瑞诺木素的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）以奇蒿的地上部分为原料，切成段状，放入高速组织捣碎机，在转速为18000rpm条件下保持3-5min后，过40目筛备用；

（2）原料按照料液比1:12-16（g/ml）的比例加入乙醇水溶液后，再加入0.5%的纤维素酶，在超声功率700W、45℃条件下酶解60-90min，得到酶解原料；

（3）将酶解原料投入加入闪式提取器中，进行闪式提取，过滤得到提取液，浓缩干燥得到粗提物；

（4）将所得粗提物用甲醇溶解，干法上样至高压硅胶柱层析纯化，氯仿-甲醇溶剂系统梯度洗脱，收集瑞诺木素流分，减压浓缩，冷却析晶，得粗晶；

（5）将粗晶用丙酮重结晶得到瑞诺木素结晶。

所述步骤（2）中乙醇水溶液体积百分比为85%。

所述步骤（3）中闪式提取电压为150V，提取时间为3-5min。

所述步骤（4）中所述高压硅胶柱层析，硅胶目数为200目，耐压35MPa，柱内径为250mm，层析柱径高比为1：10。

所述步骤（4）中所述氯仿-甲醇的体积比为1:1-1:13。

所述步骤（5）中所述丙酮为90-100%的丙酮水溶液。

本发明的有益效果是：本发明操作简单，耗时短，得率高，易规模化生产；采用高压层析柱，上样量大，生产周期短，分离度好，产品纯度高。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

以奇蒿的地上部分为原料，切成1cm左右段状，放入高速组织捣碎机，在转速为18000rpm条件下保持5min后，过40目筛备用，称取1kg，按照料液比1:12（g/ml）的比例加入85%乙醇水溶液后，再加入0.5%的纤维素酶，在超声功率700W、45℃条件下酶解70min，得到酶解原料，加入闪式提取器中，提取电压为150V，提取时间为3min，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液浓缩干燥后得到粗提物，用甲醇溶解，干法上样至高压硅胶（硅胶目数为200目）柱层析纯化，耐压35MPa，柱内径为250mm，层析柱径高比为1：10，氯仿-甲醇按体积比为1:1、1:6、1:13梯度洗脱，收集瑞诺木素流分，减压浓缩，冷却析晶，得粗晶，粗晶用90%丙酮重结晶得到瑞诺木素，含量为95.2%。

实施例2：

以奇蒿的地上部分为原料，切成1cm左右段状，放入高速组织捣碎机，在转速为18000rpm条件下保持3min后，过40目筛备用，称取1kg，按照料液比1:16（g/ml）的比例加入85%乙醇水溶液后，再加入0.5%的纤维素酶，在超声功率700W、45℃条件下酶解90min，得到酶解原料，加入闪式提取器中，提取电压为150V，提取时间为5min，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液浓缩干燥后得到粗提物，用甲醇溶解，干法上样至高压硅胶（硅胶目数为200目）柱层析纯化，耐压35MPa，柱内径为250mm，层析柱径高比为1：10，氯仿-甲醇按体积比为1:1、1:7、1:13梯度洗脱，收集瑞诺木素流分，减压浓缩，冷却析晶，得粗晶，粗晶用100%丙酮重结晶得到瑞诺木素，含量为94.8%。

实施例3：