[发明专利]提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法无效
申请号: | 201310343210.6 | 申请日: | 2013-08-08 |
公开(公告)号: | CN104345143A | 公开(公告)日: | 2015-02-11 |
发明(设计)人: | 朱京山 | 申请(专利权)人: | 北京和杰创新生物医学科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/535 | 分类号: | G01N33/535;G01N33/558 |
代理公司: | 天津三元专利商标代理有限责任公司 12203 | 代理人: | 胡婉明 |
地址: | 北京市昌平区回龙观镇生命园路*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 提高 工作液 iga 碱性磷酸酶 活性 工艺 方法 | ||
技术领域
本发明涉及生物体外诊断试剂的制备,尤其涉及一种提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法。
背景技术
目前,免疫学检测技术及其产品已广泛应用于重大传染性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤标志物、食品安全及优生优育等众多检测领域,在这些检测技术如酶联免疫吸附试验,酶联免疫斑点法试验,胶体金快速检测试验中,酶是检测中必不可少的重要环节。目前酶的应用都是根据酶自身的特点。如亲和力,酸碱度等选择相应的酶标二抗工作液,在很多检测中容易受到外界实验环境的干扰,导致漏检,有的试验中酶的反应时间较长,不利于临床上推广。所用酶标二抗与待检样品中抗体的结合速度,成为试剂盒产品性能中灵敏度的关键。因此,有待研究提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法。
发明内容
本发明的主要目的在于克服现有产品存在的上述缺点,而提供一种提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法,通过加入低浓度的高分子聚合物达到提高抗人IgA碱性磷酸酶的反应活性,提高检测灵敏度的效果。
本发明的目的是由以下技术方案实现的。
本发明提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法,包括根据抗人IgA碱性磷酸酶自身特点配制相应的酶标二抗工作液;其特征在于,在所述配制好的酶标二抗工作液中依次加入下列物质:(1)加入低浓度高分子聚合物,使加入的高分子聚合物溶解于配制好的酶标二抗工作液中;(2)在加入高分子聚合物的酶标二抗工作液中再加入抗人IgA碱性磷酸酶,进行搅拌,使其充分溶解,得到提升抗人IgA碱性磷酸酶活性的酶标二抗工作液。
前述的提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法,其中,所述配制好的酶标二抗工作液中加入的高分子聚合物重量百分比浓度为1±0.5%,且该高分子聚合物为聚乙二醇6000或聚乙烯吡咯烷酮K30。
前述的提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法,其中,所述酶标二抗工作液为含有蛋白的磷酸缓冲液或者磷酸盐缓冲液(PBS)。
前述的提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法,其中,所述在加入高分子聚合物的酶标二抗工作液中再加入的抗人IgA碱性磷酸酶的重量百分比浓度为0.06%。
本发明权利要求1所述的提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法在酶联免疫吸附试验、酶联免疫斑点法试验或者胶体金快速检测试验中的应用。
本发明提高抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法的有益效果,本发明通过加入低浓度的高分子聚合物而改变酶标二抗工作液中的成分,使抗人IgA碱性磷酸酶能够结合更多的特异性抗体,从而有效提高抗人IgA碱性磷酸酶的反应活性。低浓度的高分子聚合物可以促进抗人IgA碱性磷酸酶与待检样品中的IgA碰撞几率,提高抗人IgA碱性磷酸酶和IgA结合速度,同时又避免了非特异性反应。
附图说明
图1为本发明酶标二抗工作液中加入聚乙二醇6000后的抗EA-IgA试验结果。
图中标号说明:
1、2、3、4、5为EA-IgA阳性样本;
6、7、8为EA-IgA阴性样本。
A行是使用本发明的方法配制的酶标二抗工作液的检测结果。
B行是使用现有技术方法配制的酶标二抗工作液的检测结果。
具体实施方式
本发明提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法,包括根据抗人IgA碱性磷酸酶自身特点配制相应的酶标二抗工作液;其改进之处在于,在所述配制好的酶标二抗工作液中依次加入下列物质:(1)加入低浓度高分子聚合物,使加入的高分子聚合物溶解于配制好的酶标二抗工作液中;(2)在加入高分子聚合物的酶标二抗工作液中再加入抗人IgA碱性磷酸酶,进行搅拌,使其充分溶解,得到提升抗人IgA碱性磷酸酶活性的酶标二抗工作液。
本发明提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法,其中,所述配制好的酶标二抗工作液中加入的高分子聚合物重量百分比浓度为1±0.5%,且该高分子聚合物为聚乙二醇6000或聚乙烯吡咯烷酮K30。所述酶标二抗工作液为含有蛋白的磷酸缓冲液或者磷酸盐缓冲液(PBS)。所述在加入高分子聚合物的酶标二抗工作液中再加入的抗人IgA碱性磷酸酶的重量百分比浓度为0.06%。
本发明权利要求1所述的提高酶标工作液抗人IgA碱性磷酸酶活性的工艺方法在酶联免疫吸附试验、酶联免疫斑点法试验或者胶体金快速检测试验中的应用。
实施例:
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