[发明专利]一种山栀子苷B的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种山栀子苷B的制备方法。

背景技术

山栀子苷B属于环烯醚萜糖苷类物质，CAS号24512-62-7，分子式C17H24O11，分子量404.37，分子结构式：

 山栀子又叫黄栀子、山栀、白蟾，是茜草科植物栀子的果实，含黄酮类栀子素、果胶、鞣质、藏红花素、藏红花酸、D-甘露醇、廿九烷、β-谷甾醇，栀子苷、去羟栀子苷泊素-1-葡萄糖苷及山栀苷B等成分，具有泻火除烦、清热利湿、凉血解毒的功效，用于治疗心脑血管、肝胆等疾病。

通过文献检索，现有山栀子苷B的制备方法，多采用大孔树脂和硅胶柱分离。此类方法存在操作复杂，收率低的技术缺陷。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术不足和缺陷，提供一种操作简便的山栀子苷B的制备方法。

本发明的目的是这样来实现的：一种山栀子苷B的制备方法，其特征在于在于以下步骤：

1）将鲜山栀子原料打浆，加入3-10倍量95%乙醇充分搅拌，沉淀，抽滤上清液，滤渣再加入95%乙醇溶液充分搅拌，合并两次提取液回收乙醇，浓缩液加入适量水稀释后加入超滤膜超滤，透过液再加入纳滤膜纳滤，收集浓缩液；

   2）上述浓缩液加入乙酸乙酯萃取，弃乙酸乙酯层，母液继续浓缩成浸膏采用高速逆流色谱分离，根据图谱收集流分，流分减压干燥即得。

    所述步骤1）中的超滤膜可选截留分子量3000-6000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量为300的中空纤维素膜。

所述步骤2）高速逆流色谱分离条件为：溶剂系统选乙酸乙酯、正丁醇、水，混合比例2-5:1-3:3-7，取上相做固定相，下相做流动相，主机转速700-1000rpm，流速1-3ml/min。

采用本发明制备山栀子苷B，生产工艺简单，产品纯度高，生产成本低，易于实现工业化生产。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

取10kg鲜山栀子原料打浆，加入10倍量95%乙醇充分搅拌，沉淀，抽滤上清液，滤渣再加入3倍量95%乙醇溶液充分搅拌，合并两次提取液回收乙醇，浓缩液加入10kg水稀释后加入截留分子量3000的中空纤维素膜超滤，透过液再加入截留分子量为300的中空纤维素膜纳滤，收集浓缩液加入3L乙酸乙酯萃取，弃乙酸乙酯层，母液继续浓缩成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、水，按比例2:1:3混合，取上相注入色谱管做固定相，主机转速700rpm，取下相做流动相，流速2ml/min，根据图谱收集流分，流分减压干燥得白色山栀子苷B2.3g，经HPLC检测，含量98.5%。

实施例2：

取10kg鲜山栀子原料打浆，加入9倍量95%乙醇充分搅拌，沉淀，抽滤上清液，滤渣再加入5倍量95%乙醇溶液充分搅拌，合并两次提取液回收乙醇，浓缩液加入20kg水稀释后加入截留分子量6000的中空纤维素膜超滤，透过液再加入截留分子量为300的中空纤维素膜纳滤，收集浓缩液加入4L乙酸乙酯萃取，弃乙酸乙酯层，母液继续浓缩成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、水，按比例4:3:7混合，取上相注入色谱管做固定相，主机转速800rpm，取下相做流动相，流速3ml/min，根据图谱收集流分，流分减压干燥得白色山栀子苷B2.5g，经HPLC检测，含量95.1%。

实施例3：

取10kg鲜山栀子原料打浆，加入8倍量95%乙醇充分搅拌，沉淀，抽滤上清液，滤渣再加入6倍量95%乙醇溶液充分搅拌，合并两次提取液回收乙醇，浓缩液加入15kg水稀释后加入截留分子量4000的中空纤维素膜超滤，透过液再加入截留分子量为300的中空纤维素膜纳滤，收集浓缩液加入2L乙酸乙酯萃取，弃乙酸乙酯层，母液继续浓缩成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、水，按比例5:2:5混合，取上相注入色谱管做固定相，主机转速900rpm，取下相做流动相，流速1ml/min，根据图谱收集流分，流分减压干燥得白色山栀子苷B2.5g，经HPLC检测，含量98.2%。

实施例4：

取10kg鲜山栀子原料打浆，加入8倍量95%乙醇充分搅拌，沉淀，抽滤上清液，滤渣再加入7倍量95%乙醇溶液充分搅拌，合并两次提取液回收乙醇，浓缩液加入10kg水稀释后加入截留分子量3000的中空纤维素膜超滤，透过液再加入截留分子量为300的中空纤维素膜纳滤，收集浓缩液加入4L乙酸乙酯萃取，弃乙酸乙酯层，母液继续浓缩成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、水，按比例4:1:7混合，取上相注入色谱管做固定相，主机转速850rpm，取下相做流动相，流速2ml/min，根据图谱收集流分，流分减压干燥得白色山栀子苷B2.2g，经HPLC检测，含量97.5%。