[发明专利]硫肽前体蛋白质、编码该蛋白质的基因及其用途

权利要求书

1.包含选自以下的氨基酸序列的硫肽前体蛋白质：

（i）SEQ ID NO:1;

（ii）SEQ ID NO:5;

（iii）SEQ ID NO:11;

（iv）或当与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:11相比时，具有不超过1、2、3、4、5、6或10个缺失、插入和/或取代氨基酸的所述氨基酸序列的变体。

2.权利要求1的硫肽前体蛋白质，其中所述前体是Ef-tu硫肽抑制剂的生物合成前体。

3.权利要求2的硫肽前体蛋白质，其中所述Ef-tu抑制剂选自GE2270A、GE37648A、Amythiamicin或如以下任意通式I-XI中的任意通式所示的化合物：

4.核酸，其包含编码权利要求1-3中任一项的硫肽前体蛋白质的核苷酸序列。

5.权利要求4的核酸，其包含SEQ ID NO:5的核苷酸序列。

6.权利要求5的核酸，其包含SEQ ID NO:6的核苷酸序列或包含至少SEQ ID NO:5的其任何片段。

7.权利要求4-6中任一项的核酸，其中所述核酸序列有效连接异源转录和翻译控制序列。

8.权利要求7的核酸，其中所述核酸是表达载体。

9.用于硫肽生物合成的多肽，其包含选自以下的氨基酸序列：

(i)SEQ ID NO:23-34中的任一个，

(ii)(i)中列出的氨基酸序列的变体，当与(i)中列出的相应野生型氨基酸序列相比时，其具有不超过1、2、3、4、5、6、或10个缺失、插入或取代氨基酸，并保留基本上相同的酶功能。

10.核酸，其包含编码权利要求9的多肽的核苷酸序列。

11.权利要求10的核酸，其中所述核酸序列有效连接异源转录和翻译序列。

12.包含权利要求4-6中任一项的核酸的宿主细胞，其中在所述宿主细胞的基因组中未天然发现所述核酸。

13.权利要求12的宿主细胞，其还包含硫肽生物合成所需的其他基因。

14.权利要求13的宿主细胞，其中硫肽生物合成所需的所述其他基因包含权利要求10或11定义的核酸。

15.权利要求13或14的宿主细胞，其选自野野村氏菌属物种、游动双孢菌属物种、拟无枝酸菌属物种、大肠杆菌（Escherichia coli）、棒杆菌属物种（Corynebacterium sp.）、芽孢杆菌属物种（Bacillus sp.）和链霉菌属物种，如变铅青链霉菌、天蓝色链霉菌、白色链霉菌（Streptomyces albus）、Streptomyces ramocissimus、丘链霉菌（Streptomyces collinus）、弗氏链霉菌（Streptomyces fradiae）、远青链霉菌或灰色链霉菌（Streptomyces griseus），并且其中所述宿主细胞针对所述硫肽提供抗性。

16.突变体微生物，其中与相应野生型微生物相比时，所述突变体微生物不再表达编码如权利要求1-8中任一项定义的硫肽前体蛋白质的基因。

17.权利要求16的突变体微生物，其中所述突变在相应野生型微生物中是编码如权利要求1-8中任一项定义的硫肽前体蛋白质的基因的破坏。

18.权利要求17的突变体微生物，其中所述微生物是野野村氏菌属物种并且所述突变是包含SEQ ID NO:15或SEQ ID NO:16的基因的破坏。

19.权利要求16-18中任一项的突变体微生物，其中用权利要求1-8中任一项的核酸进一步转化所述突变体。

20.突变体微生物，其中所述突变体微生物不再表达编码如权利要求9定义的一个或多个多肽的一个或多个基因。