[发明专利]一种猪GAPDH蛋白抗体及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种猪GAPDH蛋白抗体，其特征在于，以猪的GAPDH蛋白作为抗原免疫动物，分离动物抗血清，纯化得到猪GAPDH蛋白抗体。

2.权利要求1所述猪GAPDH蛋白抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1. 克隆得到猪GAPDH基因，将猪GAPDH基因进行原核表达得到猪GAPDH蛋白；

S2. 将猪GAPDH蛋白与等剂量的免疫佐剂均匀混合，制成免疫原，皮下注射纯种新西兰兔，经过四次免疫后，收集兔血清，通过蛋白A琼脂糖凝胶纯化获得GAPDH抗体。

3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤S2所述免疫原的制备方法为：将400μL纯化的猪GAPDH蛋白和600μL PBS溶液和1mL完全弗氏佐剂或不完全弗氏佐剂相互混合，搅拌20min混匀后得到的白色油乳剂即为免疫原。

4.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤S1原核表达时，确定IPTG诱导浓度为0.01mM，诱导时间为5小时。

5.权利要求1所述猪GAPDH蛋白抗体的应用，其特征在于，所述猪GAPDH蛋白抗体能够高效特异识别猪GAPDH蛋白，应用于通过ELISA、Western blot检测猪相关蛋白的表达情况。