[发明专利]一种氧化树舌酸D的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物提取分离领域，尤其涉及一种从树舌中制备氧化树舌酸D的方法。

背景技术

氧化树舌酸D（Applanoxidic acid D）属三萜类化合物，分子式C₃₀H₄₀O₈，分子量为528.64，纯品为结晶，mp206-207℃，结构式为

。

多孔菌科（Polyporaceae）树舌（Ganoderma applanatum）子实体中氧化树舌酸D的含量较高。现有医学研究表明，氧化树舌酸D具有抗肿瘤促进作用。在Raji细胞中对TPA诱导的EB病毒早期抗原（EBV-EA）活性有抑制作用。

三萜类化合物是由数个异戊二烯去掉羟基后首尾相连构成的物质。大部分为30个碳原子，少部分含27个碳原子的萜类化合物。三萜类成分（又叫灵芝酸）在自然界分布很广，鲨鱼油、甘草、五味子的有效成分中都有三萜类物质。灵芝三萜类成分有五环萜和四环三萜两类，按分子所含碳原子数可分为G30、G27、G24三大类，根据其所含功能团和不同的侧链，还可分成7种基本骨架。

 树舌，别名赤色老母菌(《中国药用真菌》)、扁木灵芝、扁芝(江苏)、扁蕈、白斑腐菌、皂角菌(四川)，为菌类植物药多孔菌科植物树舌的全草，广泛分布于东北、西北、华东、华南、西南各省区。性味微苦、平，归、脾胃二经，具有开郁利膈、消炎抗癌的功效。

发明内容

本发明提供了一种从树舌中制备氧化树舌酸D的方法，该方法适合工业化生产。

一种氧化树舌酸D的制备方法，其特征在于所述氧化树舌酸D是由多孔菌科树舌子实体中提取的。

所述方法是将树舌子实体粉碎60-120目，加入15-20倍量体积百分比浓度为75-95%的乙醇水溶液回流提取2-3次，抽滤、回收提取液，旋转蒸发回收乙醇，得浸膏，加三氯甲烷溶超声溶解，加NaOH萃取，萃取液加入HCl调节pH至2-3，上大孔树脂，先用蒸馏水洗脱至无色，再用60-90%浓度乙醇醇梯度洗脱，收集不同浓度的乙醇洗脱液测定氧化树舌酸D的浓度，确定最佳洗脱浓度，测定所得氧化树舌酸D含量。

所述超声溶解的时间为20-80min。

所述NaOH浓度为2-5%，用量为溶液体积的5-10%。

本发明的优势在于，工艺简单，操作方便，制得产品收率提高，可工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

树舌子实体1kg粉碎60目，加入15L75%的乙醇水溶液回流提取2次，每次时间为1.5h，抽滤、回收提取液，旋转蒸发回收乙醇，得浸膏，加三氯甲烷溶超声溶解，加浓度2%NaOH溶液萃取，用量为三氯甲烷溶解溶液体积的5%，过滤的萃取液，萃取液加入HCl调节pH至2，上大孔树脂，先用蒸馏水洗脱至无色，再用浓度乙醇溶液梯度洗脱（65%、75%、85%、90%），收集不同浓度的乙醇洗脱液测定氧化树舌酸D的浓度，确定最佳洗脱浓度，测定所得氧化树舌酸D含量为93.7%。

实施例2：

树舌子实体1kg粉碎120目，加入20L95%的乙醇水溶液回流提取3次，每次时间为1h，抽滤、回收提取液，旋转蒸发回收乙醇，得浸膏，加三氯甲烷溶超声溶解，加浓度4%NaOH溶液萃取，用量为三氯甲烷溶解溶液体积的8%，过滤的萃取液，萃取液加入HCl调节pH至2.5，上大孔树脂，先用蒸馏水洗脱至无色，再用浓度乙醇溶液梯度洗脱（60%、75%、80%、90%），收集不同浓度的乙醇洗脱液测定氧化树舌酸D的浓度，确定最佳洗脱浓度，测定所得氧化树舌酸D含量为96.8%。

实施例3：

树舌子实体1kg粉碎100目，加入18L90%的乙醇水溶液回流提取3次，每次时间分别为1.5h、1h、0.5h，抽滤、回收提取液，旋转蒸发回收乙醇，得浸膏，加三氯甲烷溶超声溶解，加浓度5%NaOH溶液萃取，用量为三氯甲烷溶解溶液体积的10%，过滤的萃取液，萃取液加入HCl调节pH至3，上大孔树脂，先用蒸馏水洗脱至无色，再用浓度乙醇溶液梯度洗脱（60%、70%、85%、90%），收集不同浓度的乙醇洗脱液测定氧化树舌酸D的浓度，确定最佳洗脱浓度，测定所得氧化树舌酸D含量为96.5%。

实施例4：