[发明专利]间充质干细胞和基因修饰的间充质干细胞的用途

说明书

技术领域

本发明涉及间充质干细胞和基因修饰的间充质干细胞的用途，特别是间充质干细胞和基因修饰的间充质干细胞在制备用于治疗牙周病、修复多种原因（例如牙周病）引起的牙周骨组织及软组织缺损和/或用于牙周组织再生的产品中的用途，本发明还涉及基因修饰的间充质干细胞，以及包含间充质干细胞和/或基因修饰的间充质干细胞的组合物和细胞膜片。

背景技术

牙周病是口腔临床的常见病，是以牙周组织（包括牙周膜、牙骨质、牙槽骨和牙龈）的破坏为主要特征的感染性疾病，临床的主要表现为牙龈炎症和出血、牙周袋的形成、牙槽骨吸收及牙齿松动、移位直至丧失。牙周疾病不仅是牙齿丧失的主要原因，而且与某些全身系统性疾病的发生有关。牙周疾病在人群中普遍存在，其中牙龈炎在儿童和青少年中的患病率达70％～90%，慢性牙周炎达60%以上，侵袭性牙周炎为5%～15%，而且牙周炎占拔牙原因的30％～44％。一旦牙周附着和牙槽骨的破坏已经发生，最理想的方式是完整地重建健康的牙周组织。目前，临床常采用的牙周炎治疗方法包括：牙周基础治疗（洁治、刮治、根面平整）、牙周翻瓣术及牙周组织再生术。牙周组织再生国内外最新的研究方法有：（1）引导性组织再生术（guided tissue regeneration,GTR）:将可吸收或不可吸收的生物膜或钛膜置于牙周组织缺损处，以避免上皮组织长入牙周缺损内，牙周缺损内可置入充填材料、人工骨、载体或牙周再生诱导因子等。（2）组织工程牙周组织再生技术，其中，种子细胞的获取是研究的热点。目前发现的与牙齿相关的干细胞主要包括：牙髓干细胞、脱落乳牙牙髓干细胞、牙周膜干细胞。对这些细胞的深入研究，不仅对牙齿的发生、发育有积极作用，而且可能成为牙齿组织工程种子细胞的来源。当前，随着保存了细胞外基质的细胞膜片技术的发展，为进一步模拟组织工程中种子细胞在体内生长所需的基质微环境，从而促进细胞更好增殖分化提供了新的思路。

目前，已有许多学者尝试利用各种细胞治疗牙周病引起的牙周骨组织及软组织缺损及促进牙周组织的再生，但实验动物多采用大鼠、小鼠和狗等，这些动物的牙周情况与人类尚有差距。许多研究表明，小型猪的牙颌系统、解剖结构、生理病理等与人有极大的相似性。20世纪50年代初期，美国首先开始研究并推出了小型猪。中国实验用小型猪包括贵州香猪、海南五指山猪等，具有体型小、性成熟早、遗传背景清晰、繁殖能力强、抗疾病力较强的特点，达到了国家一级实验动物标准。小型猪作为大型动物模型已越来越多地应用于医学及口腔医学领域的研究。小型猪正常牙周组织结构与人类有极大的相似性，且小型猪可有自发性牙龈炎和牙周炎，并已经具有较成熟的牙周炎动物模型。

间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）在体内外可以诱导分化为骨、软骨等多种细胞，可以改善多种损伤组织的结构与功能，其表面标志和分化能力与牙周膜干细胞具有许多共性，因此，MSC是治疗牙周骨组织及软组织缺损和促进牙周组织再生的理想种子细胞。

发明内容

本发明的发明人经过大量实验，惊奇地发现不同来源的间充质干细胞可用于修复多种原因（例如牙周病）引起的牙周骨组织及软组织缺损和用于促进牙周组织再生，并且进一步证明了经过基因修饰的间充质干细胞、特别是肝细胞生长因子（HGF）基因修饰的干细胞具有更好的治疗效果。

本发明第一方面涉及间充质干细胞在制备用于治疗牙周病、修复牙周病引起的牙周骨组织或软组织缺损和/或促进牙周组织再生的产品中的用途。

根据本发明第一方面的用途，其中所述的间充质干细胞来源于牙周膜、脐带、脂肪组织、骨髓、脐血或胎盘。

本发明的第二方面涉及基因修饰的间充质干细胞，其特征在于将外源肝细胞生长因子基因导入间充质干细胞，并使外源肝细胞生长因子表达。

根据本发明第二方面的间充质干细胞，其中所述的间充质干细胞来源于牙周膜、脂肪组织、骨髓、脐带、脐血或胎盘。

本发明第三方面还涉及本发明第二方面所述的间充质干细胞在制备用于治疗牙周病、修复牙周病引起的牙周骨组织或软组织缺损和/或促进牙周组织再生的产品中的用途。

本发明还涉及组合物，其包含有效量的间充质干细胞以及任选的药学上可接受的载体或赋形剂，所述组合物用于治疗牙周病、修复牙周病引起的牙周骨组织或软组织缺损和/或促进牙周组织再生。在本发明的一个实施方案中，所述组合物为包含间充质干细胞的细胞悬液。优选地，所述的间充质干细胞来源于牙周膜、脂肪组织、骨髓、脐带、脐血或胎盘。