[发明专利]一种利用沙土培育微稻苗接种稻纹枯病的人工发病方法

说明书

技术领域

本发明涉及农业技术和生物技术。具体是一种利用沙土培育微稻苗接种稻纹枯病的人工发病方法。

背景技术

稻纹枯病是我国水稻生产的首要病害，每年可造成68亿多公斤稻粮损失。该病害的科学有效防治，有赖于该病害的基础研究，而许多基础研究又离不开人工接种发病这基本手段。至今，有关该病害的人工发病技术，已有不少成熟的方法，归结起来，主要有成株期接种和苗期接种方法两大类，并派生出撒施接种、嵌入接种等方法。一般地，成株期接种能获得更切合生产实际的结果，因而在品种抗病性评比和某些生产试验中应用较多，但在成株期接种方法体系中，存在费力耗时；占用空间场地较大；试验结果易受环境条件影响等突出弊病，因而阻碍了其在许多试验工作中的应用；苗期接方法，所用的稻苗相对地比成株期的小，试验占用时间和空间方面，与成株期接种方法相比，已大有改观，不过，当前国内外广为应用的苗期接种方法均是在稻苗的3～5叶期后进行接种，这种方法体系中，育苗耗时2周以上，接种观察耗时1周以上，试验工作一般要跨越3周多的时长，这对某些要求短期内获得结果的试验工作，如分子植病研究的致病突变体鉴定，抗病基因表达，以及侵染过程的病菌-寄主互作信息传递等，仍有时间过长之嫌；为获得健壮的稻苗，需要提供充分的阳光和补充肥料，实施全套工作仍需使用温室等较大的空间场地；在试验期间的局部条件，如湿度、温度、肥水等控制方面，也存在一定的难度，或者受到装备条件的限制等。

发明内容

本发明的目的是利用病菌能侵染微小稻苗而正常致病的特性，提供一种在沙土培育的微稻苗上接种稻纹枯病的配套器具与实施方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

1.一种利用沙土培育微稻苗接种稻纹枯病的人工发病方法的配套器具，该配套器具由育苗盘、玻璃罩、小平底盘、大平底盘组成。

所述的育苗盘能全部平置于小平底盘内；所述的玻璃罩能将小平底盘全部罩在玻璃罩内；所述的小平底盘与玻璃罩能全部置在大平底盘内。

2.一种利用沙土培育微稻苗接种稻纹枯病的人工发病方法，实施操作步骤如下：

1）沙土准备：以普通细沙作土料，宜选取建筑用的干净细沙，将沙土置于烈日下暴晒一天，收回在干净容器内贮存备作土料。

2）配套器具准备：使用前用洁净剂洗涤干净玻璃罩、小平底盘和大平底盘；将从市面购回的育秧盘裁切成适合的育苗盘。

3）沙土装盘：将育苗盘平置于小平底盘内，取备用土料均匀装满育苗盘上的盘穴，注意不宜单独搬动育苗盘，因为育苗盘单独悬空时沙土会从盘穴底孔漏掉。取清水注入小平底盘内，清水可通过盘穴底孔渗入盘穴中的沙土，待育苗盘内全部沙土充分湿润后，在小平底盘内保持薄层浅水即可。

4）微稻苗培育：取水稻种子按常规方法浸种催芽，选取催芽萌动一致的种子点播到育苗盘穴的沙土面上，每穴一颗种子，用沙土盖种子或不盖种子。维持小平底盘内薄层浅水。将小平底盘连同盘内已播种的育苗盘移到大平底盘内，取玻璃罩将小平底盘罩在大平底盘内，取清水注入大平底盘内，形成和保持薄层浅水，使玻璃罩内部封闭并形成罩内稳定的高湿状态。

将全套育苗装置放在室内能采光的地方，一般明亮的室内散射光即能满足微稻苗生长的要求，应避免直射阳光的照晒，这容易引起玻璃罩内增温，在温度为30℃条件下培育。

培育的微稻苗的苗高小于8cm，以4～5cm最合适。

5）接种体准备：将待接种菌株移植到PSA平板培养基上，PSA培养基为：马铃薯200g、蔗糖20g、琼脂20g和水1000ml。在温度30℃条件下培养至菌落刚长满平板，取直径为6mm打孔器在平板菌落外周打取大小一致的菌丝琼脂圆块，以此菌丝块作为定量接种的接种体。

6）接种操作：取步骤4）培育获得的微稻苗，打开育苗盘上方的玻璃罩，定量挑取菌丝块放置在微稻苗基部沙土面上，菌丝块边缘触及微稻苗基部。

7）接种后管理：接种完成后，补充大、小两个平底盘的薄层浅水，重新罩上玻璃罩，回到原来育苗的条件下继续培育，将温度条件改变定为28℃。接种30小时后可见发病坏死斑，随时间推移到接种3天后，微稻苗上呈现清晰的较大病斑。

本发明的优点是：

1）整套方法全程时间短，一般不超过一周。

2）占用空间小；且配套器具装置可以叠放，空间利用率高。

3）温度、湿度和水肥等重要发病条件容易控制，一致性好。

4）病害反应清晰稳定，结果重现性好。

5）实施操作简易，过程管理简单。

6）总体技术简单，容易实现技术方法的标准化。

附图说明